论文部分内容阅读
松针多糖能降低血清中甘油三酯的含量,减少体脂含量和体重增加。葛根黄酮通过调节脂肪细胞中脂质代谢相关基因的表达,调控脂肪积累。目前,松针多糖和葛根黄酮组合对脂肪代谢的影响未见报道,因此本试验从分子水平探究松针多糖和葛根黄酮组合对3T3-L1脂肪细胞分化及脂质代谢的影响。本文采用MTT法测定松针多糖和葛根黄酮对脂肪增殖的影响;检测细胞分化8天时细胞内甘油三酯的含量及培养液中各脂肪细胞因子(ADP、LEP、TNF-α、IL-6)的浓度;去甲肾上腺素(NA)诱导的脂肪分解,检测培养液中甘油三酯的含量;分析诱导分化不同天数的3T3-L1脂肪细胞中脂类代谢相关基因(PPARα2、C/EBPα、SREBP1c、ACCα、FAS、HMG-CoAR、ATGL、HSL、ACO、CAT、ADP、LEP、IL-6、Glut4、LKB1、CaMKK、AMPK)和蛋白(ACC、FAS、ATGL、HSL、p-HSL、Glut4、LKB1、AMPK、p-AMPK)的表达。结果如下:(1)松针多糖和葛根黄酮组合显著抑制3T3-L1脂肪细胞的增殖,与葛根黄酮浓度呈剂量依赖关系。(2)细胞分化8天时,松针多糖和葛根黄酮组合明显减少细胞内甘油三酯含量,降低LEP、TNF-α和IL-6的浓度,增强ADP的分泌水平,且两者具有协同作用。(3)细胞分化12天时,松针多糖和葛根黄酮组合显著促进NA诱导的脂肪分解,且与松针多糖浓度呈正相关。(4)松针多糖和葛根黄酮组合显著上调LKB1、AMPK、ATGL、HSL、ACO、CAT、ADP、Glut4的基因表达,减少PPARγ2、C/EBPα、SREBP1c、FAS、ACCα、HMG-CoAR、LEP、IL-6 mRNA的表达,对CaMKK的表达无明显影响。(5)松针多糖和葛根黄酮组合显著抑制3T3-L1脂肪细胞中FAS、ACC蛋白的表达量,上调LKB1、AMPK、p-AMPK、ATGL、HSL、p-HSL及Glut4蛋白的表达。松针多糖和葛根黄酮组合调控脂肪细胞内脂类代谢相关基因和蛋白的表达水平,调节脂肪细胞因子的分泌,抑制细胞内脂肪合成,促进脂肪分解,引起脂肪细胞内甘油三酯含量减少,表明松针多糖和葛根黄酮组合具有调控脂肪细胞脂类代谢作用。