人白血病抑制因子真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

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人血病抑制因子(hLIF)是广泛存在于各种组织中的多功能细胞因子,克隆和表达hLIF基因具有重要的临床应用价值.为了建立能够表达活性hLIF蛋白的哺乳动物细胞表达体系,本研究从人子宫内膜组织克隆了hLIF基因并用哺乳动物细胞来表达hLIF蛋白.首先应用RT-PCR方法从人子宫内膜组织总RNA扩增出hLIF的全长基因,然后将其克隆至pcDNA3表达载体上,成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.利用脂质体介导将这一表达载体导入COS-7细胞和CHO-K1细胞,分别获得了hLIF的瞬时表达和稳定表达,为进一步进行hLIF生物学功能研究和hLIF在哺乳动物细胞中的高表达研究奠定了基础.
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