基于LC-MS/MS建立同时测定人血清10种水溶性维生素的分析方法及应用

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuehaoyou123
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目的:依照水溶性维生素的特性,基于液相色谱-串联质谱,建立同时测定血清中10种水溶性维生素的方法,为临床的大批量检测提供一种高效准确的检测方法。研究方法:色谱条件:Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(2.7μm,4.6x50mm,);流动相:A 0.05%甲酸水+5mmol/L甲酸铵,体积比为1:1;B乙腈+0.3%甲酸水,体积比为1:1;柱温为40℃;检测时间、流速和进样体积分别为6.3min、0.65ml/min和20μl;采用梯度洗脱。质谱条件:正(+)离子扫描,MRM扫描形式,ESI离子源。蛋白沉淀法,提取出血清样品中的水溶性维生素后,再进行方法学的考察与验证。按照所建立方法,应用于测定200位患者血清样本中水溶性维生素含量。结果:建立了同时测定人血清中10种水溶性维生素的方法。以质控样品计算,得日内精密度均不超过9%,日间精密度均不超过8%。结果评释本研究方法存在较高的精密度和准确度,并且保留时间较短。稳定性结果表明,血清在室温放置2 h、3次冻融循环、-20℃冷冻15天以及处理后于室温放置24 h的情况下,RSD均不超过9%,表示样品在该检测条件下稳定。结论:基于LC-MS/MS建立了一种同时检测10种水溶性维生素的检测体系,结果表明,该方法灵敏度高,分析时间短、减少了有机试剂的使用,分析营养素种类多,有良好的精密度,适用于血清检测。
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