红豆草抗盐和羟脯氨酸变异系的转化筛选及其特性研究

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本文在离体培养条件下,用根癌农杆菌转化红豆草愈伤组织和下胚轴。为得到高的转化频率,对转化过程中的几个重要环节进行了系统优化选择:1)共培养的培养基;2)共培养时的温度;3)共培养后的低温处理。将共培养后的洗涤材料在4℃下放置3天,即发现低温可快速抑制农杆菌的生长,对材料的生活力影响不大且3天为最佳。4)在一定梯度的NaCl浓度下,经过三个月的筛选,得两个变异系(LBA-2,LBA-5)。5)在一定梯度浓度的HYP培养基中持续筛选的材料,未得到变异系。6)在经1.4﹪NaCl和8mmol/LHYP交叉选择压力下,又得到两种高脯氨酸含量分别是对照5倍和7倍的变异系。7)经优化筛选的转化下胚轴,在两个月内可得到分化组织。
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