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背景与目的：结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，随着人们生活和饮食习惯的不断改变，其发病率和死亡率有逐年上升的趋势，严重威胁着人类的身体健康。肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的主要生物学特性，是引起肿瘤患者死亡的主要原因之一，而浸润与转移是个复杂的过程，涉及到肿瘤细胞和细胞外基质的某些重要物质的相互作用，其中最关键的一步是对细胞外基质(extra cellular matrix，ECM)和基底膜(basement membrane，BM)的降解。结直肠肿瘤发生发展是多阶段性、多基因参与及多种转录因子调控的过程，涉及一系列病理生理反应，包括细胞异常的增殖、粘附、运动，细胞外基质降解，血管生成等。癌基因Ets(E26 transformation-specific，Ets)家族在肿瘤发生发展中起着重要作用，特别是它作为转录因子在肿瘤转移中的调控作用。Ets-1(E26transformation-specific-1，Ets-1)能调节一系列与细胞外基质降解有关的物质，如尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator，uPA)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)等，后者可通过降解细胞外基质使肿瘤细胞黏附性降低并易于游走，有利于肿瘤的浸润生长和转移。研究表明，Ets-1与许多肿瘤的发生、浸润等病理过程有关，但目前国内有关Ets-1在结直肠肿瘤中的报道还比较少，故本研究利用免疫组化SP法检测Ets-1、MMP-7、uPA在结直肠癌组织中的蛋白表达及利用RT-PCR技术检测Ets-1mRNA的表达。以上研究为进一步探讨结直肠癌发生、浸润、转移机制及寻找抑制结直肠癌发生、发展的途径提供理论基础。材料与方法1．采用免疫组织化学SP法检测56例结直肠癌组织和相应标本的40例正常组织中Ets-1、MMP-7和uPA蛋白的表达情况。2．采用RT-PCR技术对32例结直肠癌新鲜标本和相应32例正常黏膜中的Ets-1mRNA的表达进行检测。并将余组织固定，石蜡包埋切片后，应用免疫组织化学SP法检测Ets-1蛋白在癌组织和其相应正常黏膜组织中的表达。3．统计学处理：所有数据均经SPSS 13.0软件进行统计分析。计量资料采用(?)±S表示，阳性率之间的比较采用χ~2检验，两组均数的比较用t检验，两组以上均数的比较用方差分析(ANVOA)，相关性分析采用spearman相关分析，显著性水准α=0.05。结果1．免疫组化检测结果1．1 Ets-1蛋白在正常结直肠组织中的阳性率为12.5％，在结直肠癌组织中的阳性率为52.27％，其在癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05)。在浅度浸润癌组织中的阳性率为31.43％，在深度浸润组织中的阳性率为66.04％，其在深度浸润癌组织中的表达明显高于浅度浸润癌组织(P＜0.05)。Ets-1蛋白的表达在癌组织的不同分化程度组、有无淋巴结转移组均无显著差异性(P＞0.05)。1．2 MMP-7蛋白在正常结直肠组织中的阳性率为22.50％，在结直肠癌组织中的阳性率为57.14％，其在癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05)。在浅度浸润癌组织中的阳性率为39.13％，在深度浸润组织中的阳性率为69.69％，其在深度浸润癌组织中的表达明显高于浅度浸润癌组织(P＜0.05)。MMP-7蛋白的表达在癌组织的不同分化程度组、有无淋巴结转移组均无显著差异性(P＞0.05)。1．3 uPA蛋白在正常结直肠组织中的阳性率为12.50％，在结直肠癌组织中的阳性率为60.71％，其在癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05)。在浅度浸润癌组织中的阳性率为39.13％，在深度浸润组织中的阳性率为75.76％，其在深度浸润癌组织中的表达明显高于浅度浸润癌组织(P＜0.05)。在无淋巴结转移中的阳性率为51.28％，在有淋巴结转移组中的阳性率为82.35％，在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组的表达(P＜0.05)。uPA蛋白的表达在癌组织的不同分化程度组无显著差异性(P＞0.05)。1．4 Ets-1蛋白表达与MMP-7蛋白表达无显著相关性(P＞0.05)；Ets-1蛋白表达与uPA蛋白的表达存在显著的正相关(P＜0.05)；MMP-7蛋白表达与uPA蛋白表达无显著相关性(P＞0.05)。2．RT-PCR检测结果2．1 Ets-1 mRNA在正常结直肠组织中的阳性表达率为31.25％，在结直肠癌组织中的阳性表达率为59.38％，Ets-1 mRNA在癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05)。在浅度浸润癌组织中的阳性表达率为41.67％，在深度浸润组织中的阳性表达率为70.00％，其在深度浸润癌组织中的表达明显高于浅度浸润癌组织(P＜0.05)。Ets-1 mRNA的表达在癌组织中的不同分化程度组、有无淋巴结转移组均无显著差异性(P＞0.05)。2．2 Ets-1 mRNA在正常粘膜中的表达量为0.41±0.05，而在癌组织中的表达量为0.85±0.06，两者有显著差异性(P＜0.05)Ets-1 mRNA在高中分化癌的表达量0.86±0.06，在低分化癌的表达量为0.81±0.06，两者无显著性差异(P＞0.05)；在浅层浸润组的表达量为0.80±0.05，在深层浸润组为0.86±0.06，两者有显著差异性(P＜0.05)；在无淋巴结转移组的表达量0.86±0.06高于有淋巴结转移组0.82±0.06，但差异性无统计学意义(P＞0.05)。2．3 Ets-1蛋白与Ets-1 mRNA在结直肠癌的表达无显著相关性(P＞0.05)。结论1．Ets-1、MMP-7、uPA在癌组织中表达明显高于正常组织，提示三者可能参与了结直肠癌的发生；三者在结直肠癌深层浸润组中的表达明显高于浅层浸润组中的表达，提示三者可能参与了结直肠癌的发生与浸润过程。而三者在不同分化程度组之间则无显著差异，提示三者参与结直肠癌分化的可能性较小。2．Ets-1、MMP-7在有无淋巴结转移组之间无显著差异性，提示二者对促进肿瘤转移发挥作用的可能性较小；uPA在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组，提示其可能参与了肿瘤转移的过程。3．Ets-1蛋白与MMP-7蛋白在结直肠癌组织中的表达无显著相关性，uPA蛋白和MMP-7蛋白在结直肠癌中的表达没有显著的相关性，提示Ets-1和MMP-7、MMP-7和uPA对于肿瘤的发生发展过程发挥协调作用的可能性较小。4．Ets-1蛋白与uPA蛋白在结直肠癌组织中表达呈现显著的正相关，提示Ets-1基因作为转录调节因子可能参与调节uPA进行降解细胞外基质的过程，从而促进了癌组织的浸润、转移的发生。推测Ets-1基因有作为肿瘤基因诊断和基因治疗的新靶点的潜能。5．Ets-1 mRNA在结直肠癌组织中的表达明显高于正常组织，其在结直肠癌深层浸润组中的表达明显高于浅层浸润组，进一步提示Ets-1可能参与了结直肠癌的发生、发展过程。