罗丹明B的危害及其在食品中快速检测方法的建立

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罗丹明B是一种碱性工业染料,在合成过程中会产生有毒的杂质,如苯酚、苯胺、醚等,已证明罗丹明B对动物具有致癌性,且可透过人体皮肤,引起头痛、呕吐、四肢酸痛等症状。但因其具有色泽鲜艳、着色稳定、价格低廉等特点,常被一些不法商家非法用作食品着色剂(以辣椒制品为主),严重危害了消费者的健康。本论文验证了罗丹明B的危害,同时建立了其快速检测方法,为更好的检测食品中罗丹明B的残留提供了有效的技术支持。本论文分为两大部分,第一部分通过MTT比色法检测罗丹明B对正常肝细胞L02活力的影响证明了罗丹明B的危害;第二部分建立了食品中罗丹明B的快速检测方法,包括仪器检测法和直观检测法。对于仪器检测法,首先确定了超高效液相色谱测定罗丹明B的检测条件,选取辣椒酱、油辣椒、火锅底料、洞庭腊鱼和番茄沙司五种样品用碱性染料试剂盒进行前处理,测定罗丹明B回收率,得到前处理的条件的初步范围,再通过正交试验方法进一步优化,得到最佳处理条件。对于直观检测法,也选取了油辣椒、火锅底料和番茄沙司三种样品进行试验,通过加标样品与空白样品之间颜色的深浅来确定最低检测限,建立直观、高效、适用于现场的快速检测方法。实验结果表明,罗丹明B严重抑制了正常肝细胞L02的增殖,因此建立罗丹明B快速检测的方法意义重大。对于仪器检测法,首先确立了含油量较少食品(番茄沙司)中罗丹明B的提取条件:用1%醋酸/乙腈作为提取剂1,样品质量为5 g,在此基础上优化出:固相萃取小柱填料C1s与LHB比例1:1,提取剂1为0.5%醋酸/乙腈,样品质量为7 g。在最佳条件下分别添加5μg/kg、10μg/kg和20μg/kg三种水平的罗丹明B,回收率在82.19%~88.09%之间,相对标准偏差(RSD)在1.22%~1.33%之间。对于含油量较多样品,以油辣椒为实验对象,也确立了最佳提取条件:提取剂1为1.5%醋酸/乙腈,提取剂2为6g硫酸镁和1.5 g醋酸钠,分散固相萃取填料为100 mg MgSO4;其回收率在80.52%~87.63%之间,相对标准偏差(RSD)在1.03%~1.9%之间。并得出仪器检测法的检测限为0.4 μg/kg,定量限为1.3 μg/kg。对于直观目测法,通过自制填充柱,可检测出罗丹明B的最低限为100μg/kg。综上研究,罗丹明B具有毒性,严重危害人类健康;本研究中建立的仪器检测法和直观检测法简单快速、重现性好、检测限低,可定量、定性检测食品中罗丹明B。
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