目的:慢性疼痛发病率高,是严重影响患者身心健康的公共卫生问题,其发病机制不清,临床防治任重道远。二代半合成四环素类抗菌药物米诺环素具有良好镇痛作用,但该作用的细胞学机制仍不明确。为此,我们利用全细胞膜片钳技术,观察米诺环素对大鼠脊髓背角胶状质(substantia gelatinosa,SG)神经元超极化激活电流(hyperpolarization-activated current,Ih)的影响,以进一步阐明米诺环素镇痛的脊髓机制。方法:选取3-5周龄雄性SD大鼠,行乌拉坦腹腔麻醉及心脏灌流后,以腰骶膨大为中心分离出腰1-骶3段脊髓,剥离硬脊膜、软脊膜及附着神经根。用振动切片机切取厚300微米(μm)的脊髓横切片,利用全细胞膜片钳技术记录不同浓度米诺环素(1-300μM)灌流前后SG神经元Ih振幅、电流密度、激活动力学及反转电位等变化情况。结果:1.约50%SG神经元可记录到Ih,该电流可被ZD7288和Cs Cl阻断;2.大鼠SG不同形态神经元均不同比例地表达Ih;3.米诺环素对SG神经元Ih具有可逆性抑制作用;4.米诺环素对SG神经元Ih的抑制作用呈剂量依赖性,IC50为34μM;5.米诺环素使SG神经元Ih激活曲线向负电位方向移动;6.米诺环素对SG神经元Ih反转电位无明显影响。结论:米诺环素可作用于SG区超极化激活环核苷酸门控阳离子通道,迅速降低SG神经元Ih幅值、减小Ih电流密度,影响Ih激活动力学特性;提示米诺环素抑制Ih可能是其参与疼痛调控的机制之一。