【摘 要】
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目的通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(bcl-2associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(ciaplatin,DDP)耐药性的影响。方法构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG
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目的通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(bcl-2associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(ciaplatin,DDP)耐药性的影响。方法构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-1的细胞株(BAG-1-shRNA),阴性对照组使用无关序列质粒转染的细胞株(SC-shRNA),对照组使用未转染的亲本A549细胞株(Control)。western blotting检测pGCsi-BAG-1转染对A549细胞BAG-1、Bcl-2表达的影响。MTT法、流式细胞术分别检测pGCsi-BAG-1转染对DDP处理后A549细胞的增殖和凋亡的影响。结果成功构建稳定干扰BAG-1表达的A549细胞株,BAG-1-shRNA组细胞中BAG-1和Bcl-2蛋白表达显著低于SC-shRNA组和对照组(均P<0.05)。随DDP(2.5~40μɡ/ml)浓度增加,各组细胞增殖抑制率也随之升高,DDP浓度为2.5μɡ/ml时,BAG-1-shRNA组A549细胞的增殖抑制率即显著高于SC-shRNA组和对照组[(22.26±4.89)%vs(10.07±3.82)%,(8.12±4.09)%,均P<0.05]。与SC-shRNA组和对照组相比,DDP(2.5μɡ/ml)处理24h后,BAG-1-shRNA组凋亡率显著升高[(37.84±3.62)%vs(16.80±3.81)%、(17.10±3.11)%,P<0.05]。结论下调BAG-1表达可抑制DDP作用下的A549细胞的增殖并促进其凋亡。
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