目的:本课题在大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO)上,应用micro RNA基因芯片技术筛选电针治疗脑缺血后差异表达的mi RNAs,对差异表达的mi RNAs进行靶基因预测,进而筛选出与血管新生相关的差异表达mi RNAs。通过生物信息学方法,对预测靶基因进行GO和KEGG功能富集分析,探讨电针促脑缺血后血管新生的可能靶点,揭示电针可能通过调节脑缺血后mi RNAs表达变化调控血管新生。方法:选择SPF级SD雄性成年大鼠,随机分为假手术组、模型组和电针组,参照Longa改良法复制大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO),电针组选取水沟穴,治疗30min,连续治疗3d,于术后72h取缺血半暗带区大脑皮质组织,假手术组与模型组取相应部位组织。(1)Bederson五分法记录各组大鼠的神经功能缺损程度,观察电针水沟穴对MCAO大鼠神经功能的影响。(2)应用高通量微阵列芯片技术,分析各组大鼠脑组织缺血半暗带区域mi RNAs表达的差异,建立差异的mi RNA表达谱,筛选出血管新生相关差异表达的mi RNAs。(3)筛选出血管新生相关的mi RNAs,分析差异mi RNAs与预测到的血管新生相关靶基因的相关性,利用Cytoscape软件构建mi RNA-m RNA及m RNA-mi RNA-lnc RNA共表达网络。结果:(1)依据Bederson神经功能缺损评分结果显示:假手术组大鼠无神经缺损症状;假手术组相比,模型组有显著的神经缺损症状,差异有统计学意义(p<0.01);与模型组比较,电针组神经缺损减轻,差异有统计学意义(p<0.05)。(2)血管新生相关差异表达mi RNAs的筛选结果显示:与假手术组相比,模型组差异表达的mi RNAs有49个,其中上调37个,下调12个;与模型组相比,电针组差异表达的mi RNAs有21个,其中上调14个,下调7个。模型组vs假手术组与电针组vs模型组共同差异表达的血管新生相关mi RNAs11个,其中模型组表达上调的基因中在电针组表达上调有8个,下调有3个。(3)通过对血管新生相关靶基因进行GO和KEGG功能富集分析发现脑缺血模型及电针治疗后的功能注释主要有:血管内皮生长因子受体结合、血管内皮生长因子受体2结合、血管内皮生长因子结合、调节血管内皮细胞迁移、血管新生的正调控、血管内皮细胞迁移的正调节等;显著通路主要有m TOR信号转导通路、VEGF信号通路、T细胞受体信号通路、神经营养因子信号转导通路、轴突导向、B细胞受体信号通路、Erb B信号通路等。(4)利用生物信息学分析技术构建mi RNA-m RNA及m RNA-mi RNA-lnc RNA共表达网络,预测电针调控脑缺血后血管新生的可能作用靶点。结论:1.脑缺血大鼠脑组织缺血半暗带区域mi RNA的表达谱发生了变化,且差异显著,提示mi RNAs可能参与了缺血性脑卒中发生发展的基因调控。2.电针治疗显著调节了21个与血管新生相关的mi RNAs,其中上调14个,下调7个,提示电针可能通过调节mi RNAs影响了脑缺血后血管新生的病理生理学过程。