水稻磷酸盐转运体OsPht1;3和OsPht1;5的功能研究

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植物磷酸盐转运体组成了一个庞大的家族,并且在很多生理生化过程中起到非常重要的作用。在水稻13个PHT1磷转运体(PT1-PT13)中,很多转运体的功能都已有研究,如PT1,PT2,PT6,PT8,PT9,PT10和PT11,而其他转运体的功能研究还没有相关报道。本研究构建了OsPT3和OsPT5超表达载体,通过转基因得到2个基因超表达的转基因材料,并在水培条件下对转基因材料进行了生理分析,结果如下:1、通过潮霉素鉴定和SOUTHERN BLOT分析,分别得到了2个OsPT3超表达株系OsPHT1:3(O)-1(PT3(O)-1)和OsPHT1:3(O)-3(PT3(O)-3),和2个OsPT5超表达株系OsPHT1:5(O)-1(PT5(O)-1)和OsPHT1:5(O)-3(PT5(O)-3)。 RT-PCR结果分析表明,在转基因材料中,OSPT3和OsPT5分别在PT3(I)和PT5(O)转基因株系中被超表达。2、在高磷(HP:200μM Pi)和低磷(LP:20μM Pi)条件下水培一个月的转基因水稻的表型性状显示,在高磷条件下,转基因株系的地上部和根部的生物量明显低于野生型,并且表现出叶尖坏死的磷中毒症状。3、有效磷分析发现,PT3超表达株系地上部和根部的有效磷含量在高磷、低磷条件下都远远高于野生型,PT5超表达株系在高磷条件下,地上部和根部的有效磷含量也高于野生型,但是在低磷条件下,地上部和根部的有效磷含量都与野生型相差不大。4、对PT3(I)和PT5(O)转基因株系的地上部和根部的磷含量和金属元素包括钾、镁、铁、钙、锌、锰、铝和钠的含量进行分析,结果显示,在高磷和低磷条件下,PT3(O)转基因材料相对于野生型,地上部和根部的总磷含量都显著升高。PT5(O)转基因株系在高磷条件下,总磷含量也高于野生型;但在低磷条件下,总磷与野生型相比,没有显著差异。
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