鉴于传统的化学防治会造成环境污染等问题,寻找绿色无公害的生物农药变得尤为重要。AMEP蛋白是从枯草芽孢杆菌中鉴定一种全新的蛋白激发子,该蛋白能够诱发植株的系统获得抗性,提高植物对外界逆境环境的抗性。为了节省施用环节的成本,AMEP蛋白在应用时应考虑与叶面肥混用,是现阶段药肥一体化的趋势。本研究通过过敏反应为蛋白活性指标进行辅剂筛选,确定最适宜的辅剂组成;随后以大豆为试验品种,设置对照、蛋白、蛋白+辅剂的处理组合,通过盆栽试验和田间试验验证辅剂的作用效果。具体研究结果如下:1.以过敏反应为检测指标,检查叶片注射蛋白部位的坏死枯斑大小,确定各辅剂对AMEP蛋白活性的影响。结果显示:硫酸亚铁、尿素、硫酸铜、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠在低浓度时使AMEP蛋白活性最佳;磷酸二氢钾抑制了蛋白活性,不宜添加;硼酸在中浓度时使AMEP蛋白活性最佳;p H在7-8时蛋白活性最佳;随后,将上述辅剂进行混合并进行梯度设置,发现从0.5倍混合辅剂浓度引起的过敏反应效果最佳;最后确定AMEP蛋白应添加的辅剂组合为:尿素0.05 g/l、硫酸亚铁0.06 g/l、硫酸铜0.005 g/l、硫酸锰0.01 g/l、硼酸0.2 g/l、硫酸锌0.05 g/l、钼酸钠0.005 g/l,p H调至7-8。2.通过盆栽试验验证辅剂对AMEP蛋白活性的提升,设置对照、蛋白、蛋白+辅剂3个处理组合,检测大豆抗旱性的相关指标。结果显示:在干旱胁迫期间,在株高、茎粗、植株鲜重和植株干重表型指标方面,蛋白+辅剂处理相对于蛋白处理分别提升了5.45%、5.3%、2.80%和2.81%;抗氧化酶系统方面,POD活性、SOD活性、抗坏血酸含量和CAT活性分别提升了7.6%、6.8%、12.9%、11.2%;膜脂过氧化物质方面,丙二醛含量、电解质渗透率分别下降了10.1%、10.0%,而根系活力、超氧阴离子产生速率和过氧化氢含量分别提升了4.2%、2.9%、5.4%;渗透性调节物质方面,可溶性蛋白含量、可溶性糖含量和游离脯氨酸含量分别提升了12.2%、7.1%、10.7%;光合指标方面,净光合速率、蒸腾速率和气孔导度分别提升了1.4%、10.6%、10%,胞间二氧化碳浓度降低了7.2%,原初光能转化效率、实际光化学量子产量、光化学猝灭系数和非光学猝灭系数等荧光参数分别提升了3.8%、6.0%、2.7%和1.8%,叶绿素含量提升了3.5%。以上结果显示,加入辅剂后进一步提升了大豆的各项抗旱相关的生理指标,证明辅剂进一步提升了AMEP蛋白的活性。3.通过田间试验验证辅剂对AMEP蛋白活性的提升,设置对照、蛋白、蛋白+辅剂3个处理组合,检测大豆结荚、粒数、亩产等产量指标。结果显示:在初花期阶段,在株高、节数、茎粗和开花数上,蛋白+辅剂处理相对于蛋白处理提升了3.8%、4.7%、8.3%、7.3%;在结荚期阶段在荚数、荚重上提升了6.1%、15.1%;在成熟期阶段,总粒重和百粒重分别提升了0.8%、3.9%,瘪荚数降低了4.2%。在产量水平上,对照组大豆为172.1公斤/亩,蛋白处理组为182.2公斤/亩,蛋白+辅剂处理组为189.34公斤/亩,蛋白+辅剂处理较蛋白处理产量提升了3.91%。进一步验证了辅剂对AMEP蛋白活性的提升。综上所述,辅剂优化后的AMEP蛋白在干旱条件下,提高了大豆苗期表型指标,增强了大豆叶片的抗氧化能力、渗透调节能力,缓解了过氧化对植株的损伤,增强了抗旱能力。在田间试验中进一步提高了百粒重、总荚数和荚重,显著降低了瘪荚数,提高了大豆产量。这表明辅剂对AMEP蛋白活性具有明显的提高效果,可为AMEP蛋白在农业生产中应用提供经验和指导。