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马立克氏病病毒(MDV)是一种致T细胞瘤的疱疹病毒，然而病毒的致肿瘤机制仍不十分清楚。本研究通过RT-PCR法，从感染MDV标准毒株648A、RB1B、MD11、CVI988、Z4、HVT感染的CEF细胞总RNA中扩增vIL-8基因序列。实验结果表明，Ⅰ型MDV毒株均可扩增出约430bp的cDNA片段，Ⅱ、Ⅲ型MDV未能扩增出相应片段。将扩增出的基因片段克隆进载体pGEM-T easy中，构建成pT-vIL8质粒，进行测序，通过序列分析证明，所获得的648A、RB1B、MD11、CVI988毒株的vIL-8基因序列与所发表的GA株的vIL-8序列完全一致。这一结果表明，vIL-8基因在Ⅰ型马立克氏病病毒基因组中为一高度保守序列，提示该序列可用于MDV Ⅰ型病毒的鉴定。 为了进一步了解vIL-8的生物学活性，我们用限制性内切酶BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ酶切消化pT-vIL8质粒，然后插入经BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ酶切好的原核表达载体pGEX-5X-3中，构建成pGEX-vIL-8质粒，将pGEX-vIL-8质粒DNA转化大肠杆菌BL21，以IPTG诱导表达。研究结果证明，所构建的表达质粒能表达vIL8-GST融合蛋白，说明融合表达性质粒pGEX-vIL8构建正确。表达产物活性分析发现，vIL-8基因重组产物具有趋化鸡外周血淋巴细胞的活性，这一结果提示MDV在感染过程中，vIL-8吸引易感细胞，促进病毒感染，并可能参与了肿瘤的扩散和发展。 将vIL-8基因片段插入真核表达载体pcDNA3.1(+)／zeo，构建成真核表达性质粒pcvIL-8，将其转染宿主细胞COS-1，取转染48小时后的细胞培养上清做趋化试验，试验结果证明COS-1细胞表达了vIL-8多肽，细胞上清有明显的趋化活性，且滴度高达10~5。 细胞因子往往具有免疫调节作用，尤其在基因免疫过程中，该作用更为明显。为了弄清病毒编码的vIL8是否也具有免疫调节作用，本研究将转染pcvIL-8 DNA的COS-1细胞培养上清与人O型血红细胞(RBC)混合，腹腔免疫注射小鼠，同时设立对照，测定在含有vIL-8的情况下，小鼠对人O型RBC的抗体反应性。通过计算抗体积数，t检验分析不同处理组的差异性。实验结果表明，小鼠抗O型RBC的抗体滴度在实验组与对照组差异不显著，这一结果提示，vIL-8对肌体体液免疫无明显的调节作用；为进一步证明这样的结论，我们用同样的设计，采用不同的免疫原进行了试验。即将vIL-8真核表达载体(pcvIL-8)与J亚群白血病的env基因真核表达载体(pcALV-Jenv)联合基因免疫5日龄鸡，分别间隔10天采血、扬州大学硕士学位论文分离血清，用间接免疫荧光法检测抗体滴度。以pevIL一8裸质粒与ND活疫苗联合免疫雏鸡。试验结果表明，试验组与对照组抗体滴度无显著差异，这些结果表明，上述免疫途径或方法加入的v几一8，对机体体液免疫无明显的调节作用，然而通过其它途径能否对机体免疫有调节作用还有待进一步的研究。