重组人干扰素α-2b的纯化研究

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该文系统地介绍了膨胀床吸附分离技术,并研究了其在实际的生物工程药物--重组人干扰素α-2b分离纯化中的应用.1.以溶菌酶为目标蛋白,研究了Streamline SP吸附介质在膨胀床中的膨胀性能、流体力学性能以及蛋白质在吸附介质上的吸附性能,并将膨胀床吸附分离技术应用于卵清纯化溶菌酶的实际过程,结果表明通过Streamline SP膨胀床一步分离纯化,溶菌酶活性收率达到86.6%,纯化因子达到62.6;2.通过使用疏水性膨胀床介质Streamline phenyl分离纯化rHu IFN α-2b,可以有效的分离纯化rHu IFN α-2b,去除细胞碎片;在Streamline phenyl疏水性膨胀床操作的放大过程中,过程中干扰素的活性收率可以达到80%左右,整个过程的处理量可以达到50.4 mgIFN/升介质;3.应用自修饰的Streamline CB膨胀床介质提取裂解液中rHu IFN α-2b过程中,在纯化rHu IFN α-2b的同时,细胞碎片被有效的去除,单步纯化因子达到5.0左右,活性收率达到150%左右;在Streamline CB色素亲和膨胀床吸附的放大过程中,过程的处理量为疏水性膨胀床吸附操作的两倍;4.在色素亲和膨胀床吸附操作之后,进一步利用离子交换层析和凝胶过滤层析来分离纯化rHu IFNα-2b,可以将总纯化因子提高到20左右.整个过程的收率在20%以上.整个纯化过程得到的rHu IFN α-2b的比活在0.6~0.8×10<8>U/mg,接近纯品rHu IFNα-2b的比活1.0×10<8>U/mg.
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