百香果皮多糖对脂多糖刺激的广西灵山麻鸡免疫、抗氧化功能及肠黏膜屏障的影响研究

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在日常生产中,动物遭受的应激往往都是长期的慢性应激,通过腹腔注射脂多糖(LPS)来模拟广西灵山麻鸡机体慢性细菌感染炎症状态,研究日粮中添加不同剂量百香果皮多糖对LPS刺激下的广西灵山麻鸡免疫、抗氧化功能以及肠道黏膜屏障的影响,以此来评价百香果皮多糖能否发挥营养调控作用缓解免疫应激。新鲜百香果皮经醇提法后制得百香果皮多糖,使用苯酚-硫酸法测定多糖含量;高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖分子量分布;高效液相色谱(HPLC)外标定量法测定单糖组成及比例。阶段一(正饲期):试验使用900只1d体况相近、公母各半广西灵山麻鸡,将其随机分为5个处理组(每组6个重复、每个重复30只)。各组均为基础日粮+多糖,其中K组为空白处理,A、B、C、D四组多糖剂量依次为:250、500、1000、2000mg/kg。阶段二(应激期):各个处理组分为2个亚组即LPS+、LPS-,每个亚组6个重复,每个重复15只。LPS+处理亚组在28d开始隔天1次,连续3次腹腔注射LPS,注射量为(5ml/kg BW),LPS-处理亚组以相同方式注射等量生理盐水。在33d每个重复随机抽取1只共6只进行称重、采血、屠宰、剖腹取样。阶段三(恢复期):正常饲喂14d后,于47d采样,具体方式同33d。结果如下:多糖理化性质:多糖含量为74%,数均分子量(Mn)为1139,重均分子(Mw)为220883,D(Mw/Mn)为193.9271。主要由甘露糖、氨基葡萄糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成,百分比为1.75:0.29:0.11:1.11:0.23:10.69:7.19:0.97:0.32:0.51:0.09,半乳糖醛酸是其主要的单糖类型。生产性能:1-27d,B组BW、ADFI、ADG高于其余组但不显著(P>0.05)。28-32d,B、C亚组ADFI较其余组显著提升(P<0.05)。LPS+处理下,32d,B组血清ACTH、CORT显著低于K组(P<0.05),C组CORT显著低于K组(P<0.05);46d,B组血清GH、IGF-1显著高于K组(P<0.05),CORT显著低于K组(P<0.05)。免疫器官:46d,B处理2个亚组法氏囊指数高于其余组但不显著(P>0.05)。血清生化:46d,LPS+处理下,B、C组谷草转氨酶、谷草/谷丙、肌酐、葡萄糖水平呈下降趋势但不显著(P>0.05)。血清炎症因子:32d,B、C亚组IL-1β、IL-2、TNF-α显著低于K组(P<0.05)。46d,B亚组IL-1β、TNF-α显著低于对照组(P<0.05)。血清免疫:32d,LPS-处理下,B、C组Ig M显著高于K组(P<0.05);LPS+处理下,B、C组Ig M显著高于K组(P<0.05),C组s CD8显著高于K组(P<0.05),B组s CD4显著高于K组(P<0.05)。46d,LPS+处理下,C组Ig M高于K组但不显著(P>0.05)。血清抗氧化:32d,LPS+处理下,C组GHS-Px水平显著高于K组(P<0.05),MAD、8-OHd G显著低于K组、B组(P<0.05);46d,LPS+处理下,C组GHS-Px、T-AOC显著高于K组(P<0.05),LPO显著低于K组、B组(P<0.05)。肠道:LPS+处理下,C组显著提升回肠绒毛高度,降低空肠隐窝深度(P<0.05);K组Oclaudin显著高于B组(P<0.05),其s Ig A水平显著高于A组(P<0.05)。32d,C组十二指肠IL-2水平显著高于K组(P<0.05);46d,C组IL-1β显著低于K组(P<0.05);46d,C组盲肠丙酸、乙酸、丁酸水平高于K组但不显著(P>0.05),C组Shannon、Sobs、Chao指数显著高于K组(P<0.05),Simpson指数显著低于K组(P<0.05)。在LPS刺激下随着多糖剂量提高,32d麻鸡盲肠微生物相对丰度显示:厚壁菌门逐渐降低,拟杆菌门逐渐升高。而46d麻鸡盲肠微生物厚壁菌门相对丰度显示:厚壁菌门逐渐升高,拟杆菌门逐渐降低。百香果皮多糖能够提高麻鸡采食量,促进生长激素分泌,降低血清炎症因子水平,提升机体免疫力,增强机体抗氧化能力,改善肠道形态,影响盲肠SCFA成分、调节盲肠菌群结构。综合而言,1000mg/kg百香果皮多糖在试验中效果最佳,可作为天然植物添加剂用于生产。
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