论文部分内容阅读
背景: 卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一。其发病率居妇科恶性肿瘤第三位,病死率却高居榜首。卵巢癌传统的方式有手术治疗及术后铂类和紫杉醇联合化疗。但由于其早期难以发现,易复发、易转移、及多重耐药性,卵巢癌晚期患者生存率不足20%。因此,卵巢癌的早期诊断及新的治疗手段是研究思考的重点。近些年,生物治疗备受青睐。有研究表明,作为生物治疗的重要成员,干细胞对某些肿瘤细胞具有抑制其增殖,促进细胞凋亡的作用。这为卵巢癌的治疗提供了新思路。 人脐带间充质干细胞(the human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs)是成体干细胞的一种,它具有成体干细胞的特点,同时还有易于取材、低免疫原性,不涉及伦理问题等优点。一些研究已经证实hUCMSCs对某些肿瘤细胞有抑制作用。也有研究显示其作为细胞因子IL-12基因载体在体外对卵巢癌有细胞抑制作用。 目的: 本研究为寻找一种新的治疗卵巢癌的方法,研究 hUCMSCs条件培养基对卵巢癌细胞SKOV-3凋亡的作用。 方法: 采集合适脐带,剥离外膜及血管,得到 Wharton’s胶,贴壁培养 Wharton’s胶,得到逸出的细胞;待细胞融合70%时,收集细胞,进行传代,观察细胞生长形态;取第3代培养的细胞,用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45;取第3代细胞分别进行成脂、成骨诱导分化,成骨诱导的细胞用茜素红染色,成脂分化的细胞用油红 O染色,显微镜下观察染色结果,并与未诱导的细胞进行染色对比;制备hUCMSCs条件培养基,将hUCMSCs条件培养基培养SKOV-3细胞列为实验组,完全培养基培养的SKOV-3细胞作为对照组,流式细胞仪分析其凋亡情况,并用SPSS17.0软件对结果进行分析。 结果: 1、贴壁培养Wharton’s胶,8天左右见细胞逸出,15天左右见细胞融合70%。稳定生长的细胞呈成纤维状,细胞集落呈螺旋状或旋涡状分布; 2、流式细胞仪检测第3代细胞表面抗原,见CD29、CD44呈高表达,CD34、CD45呈低表达;成骨诱导的细胞茜素红染色后见紫红色结节,对照组未见此变化;成脂诱导的细胞油红O染色后见红色脂滴,对照组未见此变化; 3、实验组与对照组SKOV-3细胞早期凋亡率没有明显变化,统计分析没有统计学意义;晚期凋亡率实验组明显高于对照组,统计分析P=0.022,具有统计学意义。 结论: 1、贴壁培养脐带Wharton’s胶可得到稳定的间充质干细胞。 2、hUCMSCs条件培养基对 SKOV-3细胞早期凋亡没有明显作用,可以促进SKOV-3细胞晚期的凋亡。