【摘 要】
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随着对乳腺癌发生发展过程中分子机制和基因改变的深入认识,生物治疗已逐渐成为临床上重要而有效的辅助治疗手段,目前已经鉴定出了许治疗的基因靶点,它们调节凋亡、增殖和细
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随着对乳腺癌发生发展过程中分子机制和基因改变的深入认识,生物治疗已逐渐成为临床上重要而有效的辅助治疗手段,目前已经鉴定出了许治疗的基因靶点,它们调节凋亡、增殖和细胞信号传导。反义寡核苷酸提供了接近肿瘤发展过程中尤其是那些无法靠小分子物质或抗体抑制的靶基因的途径。更好的化学修饰过的反义核苷酸能够增加抗核酸酶降解的能力,延长组织半衰期和提高调度。实际上,最近的临床实验已经确定这类药物具有重要的抑制靶基因表达的能力。本实验的目的是将三苯氧胺(TAM)与靶向氯离子通道CLC-3反义核苷酸链分别单独及联合作用于MCF-7乳腺癌细胞,研究它们对于肿瘤细胞增殖情况的影响。TAM为雌激素受体阻断剂,也是非特异性的氯通道CLC-3阻断剂,本实验并将对TAM、氯离子通道CLC-3反义核苷酸作用于MCF-7时,其抗肿瘤作用发生的机制进行进一步的探讨。1.我们先采用免疫组织化学的方法对临床乳腺癌的标本进行染色,发现乳腺癌组织中表达氯离子通道CLC-3,并且良、恶性组织之间有显著性差异。2.然后我们对ClC-3反义核苷酸链进行设计,并用RT-PCR方法进行鉴定,得到反义的CLC-3核苷酸链。用MTT比色法分别测定不同浓度TAM对MCF-7细胞增殖的抑制率,选取最佳给药浓度(预实验)。然后加入ClC-3反义核苷酸链对TAM10um和20um给药时对细胞增殖的抑制情况进行测定。发现三苯氧胺对MCF-7细胞能够以剂量依赖方式对其增殖有抑制,且ClC-3反义核苷酸链加大了三苯氧胺的对细胞增殖的抑制作用,说明其对三苯氧胺有协同作用。同时我们用脱氧核糖核苷酸末
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