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表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)在人类多种实体瘤组织中过度表达，且其表达异常与肿瘤增殖、分化、血管形成、侵袭转移、放疗抵抗和不良预后密切相关。尼妥珠单抗(nimotuzumab, h-R3)及西妥昔单抗(cetuximab, C225)是抗EGFR IgG型单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)，可特异性结合EGFR，阻断EGFR及其介导的下游信号传导途径，从而发挥抗肿瘤及放疗增敏作用。目前这两种单抗对食管癌放射增敏作用是否存在差异以及食管癌EGFR表达水平是否影响单抗的放射增敏作用尚未可知。研究目的:本实验旨在对比研究尼妥珠单抗、西妥昔单抗对EGFR不同表达水平的食管癌细胞株的放射增敏作用，以期为临床治疗提供实验依据。研究方法:1.采用流式细胞术(flow cytometry, FCM))测定食管癌细胞表面EGFR表达情况。2.采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)和基因测序技术(PCR-DNA)筛选K-ras野生型人食管癌细胞株。3.采用MTS法观察处理组对食管癌细胞增殖的影响，并计算细胞增殖率。4.通过流式细胞术分析细胞凋亡的变化。5.采用克隆形成实验检测h-R3、C225对食管癌细胞株放射敏感性的影响，多靶单击模型拟合细胞存活曲线。6.采用免疫印迹(Western blot)技术检测EGFR信号通路蛋白的激活。研究结果:1.流式细胞术及PCR-DNA测序法检测结果显示食管癌细胞株TE-13EGFR高表达，TE-1EGFR低表达，TE-13、TE-1细胞株K-ras基因均为野生型。2. MTS及细胞凋亡实验结果显示与无药对照组相比，单纯照射组及照射联合单抗组TE-1细胞增殖率明显减低，细胞凋亡率明显升高，而h-R3组、C225组TE-1细胞增殖率及凋亡率未见明显变化。与单纯照射组相比，照射联合单抗组TE-1细胞增殖率及凋亡率未见明显变化。与无药对照组相比，h-R3组、C225组、单纯照射组、照射联合单抗组TE-13细胞增殖率均明显减低，细胞凋亡率均明显升高。与单纯照射组相比，照射联合单抗组TE-13细胞增殖率明显降低，细胞凋亡率明显升高，照射联合C225组TE-13细胞凋亡率高于照射联合h-R3组。3.克隆形成实验结果显示h-R3、C225均增强了TE-13细胞的放射敏感性，C225的这种作用略优于h-R3。这两种单抗均未能增强TE-1细胞的放射敏感性。4.免疫印迹结果显示照射可诱导TE-13及TE-1细胞EGFR信号通路蛋白的激活。h-R3及C225均可阻滞照射诱导的TE-13细胞(EGFR高表达) EGFR信号通路蛋白的激活，C225的这种阻滞作用略优于h-R3。这两种单抗均未能阻滞照射诱导的TE-1细胞(EGFR低表达) EGFR信号通路蛋白的激活。研究结论:h-R3与C225均能增强食管癌细胞株TE-13(EGFR高表达)的放射敏感性，C225对该细胞株的放射增敏作用略优于h-R3，可能与这两种单抗阻滞EGFR信号通路蛋白激活的能力有关。h-R3与C225未能增强食管癌细胞株TE-1(EGFR低表达)的放射敏感性，这可能与食管癌细胞表面EGFR表达水平有关。