【摘 要】
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目的:探讨IL-1β诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1（UGRP1）的表达与Fas/Fas L介导凋亡通路的相关性。方法:1.体外培养大鼠甲状腺细胞（FRTL-5细胞）,予以不同浓度IL-1β（0、10、20、40 ng/ml）和相同浓度IL-1β（40 ng/ml）作用不同时间（0、12、24、48 h）刺激大鼠甲状腺细胞,采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）法检测自杀相关因子（
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目的:探讨IL-1β诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1（UGRP1）的表达与Fas/Fas L介导凋亡通路的相关性。方法:1.体外培养大鼠甲状腺细胞（FRTL-5细胞）,予以不同浓度IL-1β（0、10、20、40 ng/ml）和相同浓度IL-1β（40 ng/ml）作用不同时间（0、12、24、48 h）刺激大鼠甲状腺细胞,采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）法检测自杀相关因子（Fas）m RNA及UGRP1 m RNA表达水平。2.体外培养大鼠甲状腺细胞,采用流式细胞术检测并比较未加IL-1β及抗Fas L抗体的对照组、IL-1β（40 ng/ml）组、IL-1β（40 ng/ml）+抗Fas L（5 ug/ml）抗体组三组间甲状腺细胞凋亡率。3.体外培养大鼠甲状腺细胞,应用抗Fas L抗体降低IL-1β上调的甲状腺细胞凋亡,采用real-time PCR法检测未加IL-1β及抗Fas L抗体的对照组、IL-1β（40 ng/ml）组、IL-1β（40 ng/ml）+抗Fas L（5 ug/ml）抗体组三组间甲状腺细胞Fas m RNA及UGRP1 m RNA表达水平的变化。结果:1.应用real-time PCR方法检测,在不同浓度IL-1β刺激下,20 ng/ml组（1.88±0.22）和40 ng/ml组（2.86±0.52）Fas m RNA表达水平高于对照组（0 ng/ml）（1.01±0.19）,差异有统计学意义（F=19.35,P=0.000 5）。2.应用real-time PCR方法检测,在相同浓度IL-1β作用不同时间下,12 h组（1.92±0.51）、24 h组（2.38±0.09）和48 h组（3.63±0.28）Fas m RNA表达水平高于对照组（0 h）（1.00±0.08）,差异有统计学意义（F=40.31,P＜0.000 1）。3.应用real-time PCR方法检测,在不同浓度IL-1β刺激下,10 ng/ml组（1.74±0.27）、20 ng/ml组（2.34±0.45）和40 ng/ml组（2.94±0.22）UGRP1 m RNA表达水平高于对照组（0 ng/ml）（1.01±0.18）,差异有统计学意义（F=23.11,P=0.000 3）。4.应用real-time PCR方法检测,在相同浓度IL-1β作用不同时间下,24 h组（1.85±0.17）和48 h组（2.12±0.12）UGRP1 m RNA表达水平高于对照组（0 h）（1.01±0.18）,差异有统计学意义（F=24.96,P=0.000 2）。5.应用流式细胞术检测,与对照组比较,IL-1β组甲状腺细胞早期凋亡率升高（7.49±1.91%VS 28.46±3.17%）,差异有统计学意义（P＜0.001）;与IL-1β组比较,IL-1β+抗Fas L抗体组甲状腺细胞早期凋亡率降低（28.46±3.17%VS19.20±1.75%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。6.应用real-time PCR方法检测,在抗Fas L抗体降低细胞凋亡前后,IL-1β刺激下的大鼠甲状腺细胞Fas m RNA（2.75±0.18 VS 3.03±0.16）及UGRP1 m RNA（2.22±0.31 VS 2.66±0.28）表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:1.IL-1β以剂量-时间依赖性的方式上调大鼠甲状腺细胞Fas的表达。2.IL-1β以剂量-时间依赖性的方式上调大鼠甲状腺细胞UGRP1的表达。3.IL-1β诱导大鼠甲状腺细胞UGRP1高表达与Fas/Fas L介导的凋亡通路不相关。
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