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秋水仙碱是从欧洲百合科植物秋水仙的球茎中分离出的一种卓酚酮类生物碱。因其特殊的结构和强抗癌活性,近几年有关秋水仙碱作用机制的研究异常活跃。临床上常作为痛风性关节炎急性发作和某些癌症治疗的首选药。除此之外,秋水仙碱还广泛应用于抗炎、抗纤维化及免疫调节等方面。因其治疗量和中毒量比较接近,毒副作用较大,所以因误食含秋水仙碱的食物或因治疗剂量与中毒剂量掌握不准、交代不清药物的用法用量等原因导致临床上中毒或致死的现象很多。因此有必要对秋水仙碱药物残留进行检测方法的研究。酶联免疫分析技术(ELISA)具有前处理简单、特异性高、分析成本低等特点,以其固有的优势在药物残留分析中显示出远大的应用前景。因此本研究选择建立秋水仙碱药物的ELISA检测方法,为秋水仙碱药物的残留检测提供了分析方法。本研究采用硫酸水解反应成功地改造了秋水仙碱的分子结构,使其具有活性基团,并采用碳二亚胺(EDC)法和戊二醛(GA)法偶联载体蛋白,成功制备了秋水仙碱的包被原和免疫原。通过对包被原的筛选,选出三甲基-COL-GA-OVA作为包被原以提高检测方法的灵敏度。通过对抗血清的抑制检测筛选,选出三甲基-COL-EDC-BSA作为免疫原,免疫新西兰大白兔,成功制备了抗秋水仙碱多克隆抗体,其效价达1：10000。与p-光秋水仙碱、足叶草毒素、别嘌呤醇、非布索坦的交叉反应率均小于1%,可忽略不计。本研究同时建立了鸡肉中秋水仙碱的ELISA检测方法。通过对检测条件的优化,选择在CB缓冲液作为包被液37℃孵育2h、5%小牛血清作为封闭液37℃封闭1h、竞争反应条件4℃反应1h、浓度为1：3000的酶标二抗、pH值为7.0的PBS缓冲液、0.15mol/L的盐离子浓度的条件下,测得抗体的ICso值约为0.54ng/mL,在0.04-8.19ng/mL的线性范围内,抑制率与秋水仙碱药物浓度的对数值呈显著的线性关系,相关系数为r=0.9989。并进行了鸡肉样品的添加回收试验,检测限为0.23μg/kg,回收率在74.6～83.5%之间,变异系数在6.8-15.4%之间。在实际样本的检测中,此方法与液相色谱检测法有较好的相关性。证明本研究建立的ELISA检测方法可用于鸡肉中秋水仙碱的残留检测。