粘红酵母发酵生产辅酶Q10的研究

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本文以粘红酵母为研究对象,对粘红酵母发酵生产辅酶Q1o从发酵工艺和代谢调控两个方面进行了系统的研究。首先,利用一系列统计学方法优化粘红酵母发酵辅酶Q10发酵培养基主要成分和发酵条件。在单因素优化的基础上通过正交试验确定对粘红酵母生物量和辅酶Q10影响显著性因素;然后,利用中心组成(CCD)设计和响应面方法(RSM)获得辅酶Q10生产的优化发酵培养基,该培养基在摇瓶培养中可获得粘红酵母生物量18.648g/L,辅酶Q1016.405mg/L。成功构建了粘红酵母发酵生产细胞生长动力学模型、辅酶Q10生成动力学模型和基质消耗动力学模型,探讨了发酵方式的确立。最终确定pH恒定-定时恒速补料发酵方式,生物量和CoQl0产量达到28.887g/L和31.553mg/L。初步考察了维生素B1、维生素H3、脱落酸和三孢酸这四种化学诱导因子对辅酶Q10合成的影响。其中脱落酸和三孢酸的诱导效果较大,添加浓度分别为6mg/L和3mg/L时辅酶Q1o产量分别提高61.6%和81.868%,脱落酸和三孢酸能够促进辅酶Q1o和麦角固醇的合成,抑制β-胡萝卜素生成,且三孢酸的作用效果较脱落酸明显;在发酵36h添加6mg/LABA,同时在60h添加3mg/L酮康唑,麦角固醇产量降低21.42%,CoQ10和β-胡萝卜素的产量分别提高47.63%和201.63%。对比研究了生物诱导因子(包括植物诱导因子和真菌诱导因子)对辅酶Q10的刺激作用。在发酵培养基中分别添加300ml/L植物诱导因子海带粗提物和4ml/L海带精提物-岩藻黄素,辅酶Q1o产量分别提高4.54%和11.59%;三孢布拉霉诱导因子对辅酶Q10合成有抑制作用,40mg/L红发夫酵母诱导因子和10mg/L酿酒酵母诱导因子使辅酶Q10产量较空白样品分别提高21.66%和7.33%。
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