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本研究以一年生乌龙岭龙眼幼苗为材料,研究了酸雨胁迫下叶片CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性的变化、叶片特异蛋白的表达以及外源Ca2+的作用,探讨了龙眼叶片对酸雨胁迫的信息感受和传递机制。主要研究结果如下:1.优化了ELISA测龙眼叶片CaM含量的条件,结果表明,龙眼叶片的最佳的包被抗原浓度为5μg/ml,适宜的一抗稀释比例为1:3000,最适宜稀释倍数为40。2.不同的胁迫强度和胁迫时间影响叶片CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性的变化。在整个胁迫的过程中,CaM含量呈反复上升下降的变化趋势,但随着胁迫时间的延长,CaM含量的变化幅度逐渐下降。龙眼叶片胞质Ca2+-ATPase与H+-ATPase的活性对酸雨非常敏感,伴随模拟酸雨强度的加大其活性受到抑制。其原因可能是:细胞内较高浓度的H+的长期胁迫下,Ca-CaM信使系统逐渐受到破坏,ATP酶活性下降,导致了植物的抗性逐渐下降。3.当外源喷施10 mmol/L Ca(NO3)2作用于酸雨胁迫下的龙眼幼苗时,CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性均比无Ca(NO3)2处理高;Ca2+螯合剂EGTA则使CaM含量下降、H+-ATPase和Ca2+=ATPasc活性降低。CPZ能抑制H+-ATPasc和Ca2+-ATPase的活性。说明Ca-CaM系统在酸雨胁迫下起到信号传递的作用,Ca2+-ATPase和H+-ATPase的活性受CaM激活和调节,而喷施外源Ca2+则能促进信号传递的过程。4.利用Bio-rad公司的蛋白质图谱分析软件Quantity one和PDQuest对电泳图谱进行分析处理,得到的图谱背景清晰同时保持了数据的完整性。在本研究中,利用Quantity one软件计算SDS-PAGE图谱中蛋白质条带的分子量,并对不同处理组进行差异分析,得到各个处理间的相似率。利用PDQuest对2-DE电泳图谱进行处理,经过背景消减、点检测和匹配后,得到背景清晰的2-DE图谱、每张凝胶的蛋白点数以及差异蛋白点。5.利用SDS-PAGE分析酸雨胁迫下龙眼叶片特异蛋白的表达。从SDS-PAGE图谱可以看出,pH2.5酸雨胁迫15d后,分子量大约为23KD的蛋白特异表达,20d后,分子量大约为17KD蛋白表达增强。与pH2.5相比,pH3.5的酸雨对龙眼幼苗叶片蛋白表达影响较弱,但随着胁迫时间的增加,表达差异呈上升的趋势6.利用蛋白质双向电泳(2-DE)技术对样品进行进一步分析。结果表明,酸雨胁迫后特异表达的蛋白质组分有6个,其中C4(20.2KD pI6.0)在不同酸度酸雨的整个胁迫过程中表达,F(24KD pI6.35)在pH2.5酸雨胁迫15d后开始表达,20d后,在不同处理下均有表达,蛋白B3(22.3KD pI6.35)、B4(23.5KD pI6.5)、C5(21.8KDpI5.6)、C6(20.2KD pI5.6)的表达则与酸雨酸度、胁迫强度有关。蛋白B4(23.5KDpI6.5)仅在有外源Ca2+的处理组中表达,说明外源Ca2+与蛋白B4的表达有某种相关性。7.通过SDS-PAGE与2-DE分析发现,EGTA和CPZ处理下,有4个蛋白质组分表达增强,推测这4个蛋白质组分与龙眼响应酸雨胁迫的Ca-CaM系统有相关性。