为了探究饲料蛋白质水平对三倍体虹鳟(初始体重233.30±0.39 g)生长、品质和蛋白质代谢的影响,本研究配制了六种不同蛋白水平饲料(实测值:31.6%、35.4%、40.7%、43.3%、45.8%和52.4%),对三倍体虹鳟进行了80天的养殖实验。每种饲料投喂4个网箱作为养殖重复,每个网箱100条鱼。养殖实验结束后称重并采取血液、胃、肠道等样品,对三倍体虹鳟的生长与健康、品质以及蛋白质代谢指标进行了测定。确定了三倍体虹鳟最适蛋白质需要量,分析了饲料蛋白质水平对三倍体虹鳟品质的影响,初步掌握了青藏高原特殊生境下三倍体虹鳟蛋白质代谢特点。这些结果为三倍体虹鳟健康养殖和开发优质国产饲料提供理论依据。主要结果如下:1、生长与健康。通过生长性能、饲料利用、组织器官发育、生长相关基因mRNA表达、鱼体成分、肠道健康、抗氧化相关指标分析,探究饲料蛋白质水平对三倍体虹鳟生长与健康的影响。(1)生长性能:三倍体虹鳟末重和特定生长率随着饲料蛋白质水平升高至45.8%显著上升(P<0.05)后保持在高位(P>0.05);存活率无显著变化(P>0.05);基于特定生长率,三倍体虹鳟的饲料蛋白质需求量为45.8%干物质。(2)饲料利用:45.8%和52.4%饲料蛋白组的饲料系数显著低于其它组(P<0.05)。摄食率随饲料蛋白质水平上升至40.7%而升高(P<0.05)后保持在高位(P>0.05);随着饲料蛋白质水平的升高,蛋白质摄入量和蛋白质沉积量显著上升(P<0.05);蛋白质沉积率和蛋白质效率显著降低(P<0.05)。(3)组织器官发育:当饲料蛋白质水平从31.6%升高到40.7%时,三倍体虹鳟肥满度显著增加而肝体比显著降低(P<0.05),随后保持平稳(P>0.05);31.6%饲料蛋白质组肝脏红色值最低,显著低于40.7%、43.3%和45.8%饲料蛋白质组(P<0.05);随着饲料蛋白质水平的升高,肠长指数和Zihler指数显著降低(P<0.05);脏体比无显著变化(P>0.05)。(4)生长相关基因mRNA表达量:随着饲料蛋白质水平的升高,胰岛素样生长因子1(IGFⅠ)基因mRNA表达量呈现先上升(P<0.05)后平稳(P>0.05)的趋势,胰岛素样生长因子受体(IGFRⅠ)基因mRNA表达量在饲料蛋白质水平为35.4%-45.8%时不发生变化(P>0.05),之后显著上升(P<0.05)。(5)体成分:当饲料蛋白质水平从31.6%升高到43.3%时,鱼体水分和灰分显著降低(P<0.05),继续升高对水分和灰分没有显著影响(P>0.05);随着饲料蛋白质水平的升高,鱼体粗蛋白含量显著增加(P<0.05);鱼体粗脂肪含量呈现先增加后降低的趋势(P<0.05)。(6)肠道健康:随着饲料蛋白质水平的升高,三倍体虹鳟的肠道皱襞高度和上皮细胞厚度呈上升的趋势(P<0.05);肠道微绒毛高度呈下降趋势(P<0.05);43.3%蛋白质水平组肌层厚度显著低于35.4%蛋白质水平组(P<0.05);肠道组织中杯状细胞数量无显著性变化(P>0.05)。(7)抗氧化:随着饲料蛋白质水平的升高,血浆和肠道中的丙二醛含量显著降低(P<0.05);肝脏丙二醛含量在31.6%饲料蛋白质组最高(P<0.05);血浆中总抗氧化力水平呈现先上升后下降的趋势(P<0.05);当饲料蛋白质水平从31.6%升高到40.7%,肠道中总抗氧化力水平显著增加(P<0.05)而肝脏中总抗氧化力水平显著降低(P<0.05);52.4%蛋白质组肌肉总抗氧化水平显著低于31.6%蛋白质组(P<0.05);肌肉丙二醛含量无显著变化(P>0.05)。2、品质。通过肉色、肉质和肌肉营养成分指标分析,探究饲料蛋白质水平对三倍体虹鳟肉品品质的影响。(1)肉色:随着饲料蛋白质水平的升高,三倍体虹鳟肌肉亮度值(L*)呈现下降趋势(P<0.05);肌肉黄色值呈现先上升后下降的趋势,其中40.7%饲料蛋白质组黄色值最高(P<0.05);饲料蛋白质水平从31.6%升高到40.7%,肌肉红色值(a*)显著增加(P<0.05),继续上升对肌肉红色值无显著影响(P>0.05)。(2)肉质:随着饲料蛋白质水平的升高,肌肉厚度、弹性值、咀嚼性值、乳酸脱氢酶活力、碱溶性HYP、碱不溶性HYP、总HYP和PYD呈现显著下降的趋势(P<0.05);肌肉pH、水溶性蛋白含量、盐溶性蛋白含量显著上升(P<0.05);40.7%、43.3%、45.8%和52.4%饲料蛋白质水平组硬度显著低于31.6%和35.4%饲料蛋白质组(P<0.05)。肌肉粘附性值呈现先下降后上升的趋势(P<0.05);肌肉持水力先显著下降(P<0.05)后平稳(P>0.05);肌肉破裂力值、内聚性值、胶黏性值、肌糖原值无显著变化(P>0.05)。(3)肌肉营养成分:随着饲料蛋白质水平的升高,肌肉粗蛋白、粗脂肪含量、脂肪酸总量、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、n-3、n-6、ARA(C20:4n-6)、EPA(C20:5n-3)和DHA(C22:6n-3)含量呈现上升的趋势(P<0.05);肌肉水分和n-3/n-6呈下降趋势(P<0.05)。亚油酸(C18:2n-6)、亚麻酸(C18:3n-3)呈现先平稳(P>0.05)后上升(P<0.05)的趋势;AI和TI呈现先上升后下降的趋势(P<0.05);肌肉灰分没有显著性变化(P>0.05)。3、蛋白质代谢。通过蛋白质消化酶活力、小肽吸收关键基因mRNA表达、代谢相关酶活力及基因mRNA表达等指标分析,探究饲料蛋白质水平对三倍体虹鳟蛋白质分解代谢的影响。(1)蛋白质消化酶活力:随着饲料蛋白质水平的升高,胃蛋白酶活力显著增加(P<0.05),肠道中的胰蛋白酶和糜蛋白酶活力呈现先增加(P<0.05)后平稳(P>0.05)的趋势;幽门垂中脂肪酶和淀粉酶活力及肠道中淀粉酶活力显著降低(P<0.05);肠道中脂肪酶活力无显著变化(P>0.05)。(2)蛋白质吸收关键基因表达:小肽转运载体T1(PepT1)基因在45.8%饲料蛋白质组的mRNA表达量最高,显著高于35.4%、43.3%和52.4%饲料蛋白质组(P<0.05)。(3)代谢相关酶活力及基因mRNA表达:低饲料蛋白质水平组(31.6%)血浆中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力较高,但肝脏中谷丙转氨酶活力最低(P<0.05)。随着饲料蛋白质水平的升高,肝脏中谷氨酸脱氢酶活力呈现先下降后上升的趋势(P<0.05);肝脏中谷草转氨酶活力和肝脏中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、4E结合蛋白1(4EBP1)、S6蛋白激酶2(S6K2)基因mRNA表达量均无显著性变化。综上所述,在本研究条件下:(1)三倍体虹鳟(初始体重233.30±0.39 g)的最适蛋白质需要量为45.8%干物质(饲料脂肪为20%,饲料能量为22 KJ/g)。(2)与低饲料蛋白质水平组(31.6%-35.4%)相比,高饲料蛋白质水平组(45.8%-52.4%)三倍体虹鳟肌肉质地较松软,胶原蛋白含量较低;但具有较好的肉色,且营养成分含量增加,提高了营养价值。(3)最适蛋白水平组(45.8%)的三倍体虹鳟对蛋白质的消化吸收能力最强;当饲料蛋白质水平较低(31.6%-35.4%)时,会出现鱼体肝脏的氧化损伤,但会通过适应性地增强其蛋白质利用能力来满足生理需要;当饲料蛋白质水平较高时(52.4%),三倍体虹鳟会增强对蛋白质的吸收并促进生长。