丹参多酚酸盐抗肝纤维化药理作用的分子机制

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目的:肝纤维化是多种不同病因所致慢性肝炎的共同病理变化,也是慢性肝病发展为肝硬化的必经过程。丹参多酚酸盐是从植物丹参中提取的有效水溶性成分。本文着重探索丹参多酚酸盐在CCl4诱导的肝纤维化动物模型中的抗肝纤维化作用及其分子机制。   方法:将48只SD大鼠随机分为正常对照组(对照组)、肝纤维化组(模型组)、丹参多酚酸盐低剂量给药组(低剂量组)和丹参多酚酸盐高剂量给药组(高剂量组),每组12只。用50%CCl4/花生油溶液 (1mL·kg-1)灌胃诱导建立肝纤维化模型。低剂量组同时每日一次腹腔注射丹参多酚酸盐12.5mg·kg-1,高剂量组同时每日一次腹腔注射丹参多酚酸盐25mg·kg-1。6周之后称取肝脏重量并观察其大体形态,计算肝脏指数(肝重/体重比);运用HE和Masson三色染色检测肝纤维化的变化及胶原沉积的情况;全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的水平;放射免疫法测定血清透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原肽(PC-Ⅲ)含量;Western blot 检测肝脏组织中NF-Κb 和 IκBα蛋白的表达。   结果:⑴6周以后,模型组、低剂量组和高剂量组的大鼠体重明显低于对照组,但是高剂量组的大鼠体重高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑵模型组、低剂量组和高剂量组的大鼠肝脏重量明显高于对照组(P<0.05),但是模型组、低剂量组和高剂量组三者之间没有统计学差异(P>0.05)。⑶模型组、低剂量组和高剂量组的肝脏指数(肝重/体重比)明显高于对照组,但是高剂量组的肝脏指数低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑷与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清TBIL的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组血清中TBIL的水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑸与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清ALT的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组ALT的水平呈剂量依赖性地降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑹与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清AST的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组AST的水平呈剂量依赖性地降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑺与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清HA的含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,高剂量组血清中HA的含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑻与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清LN的含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,高剂量组血清中LN的含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑼与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清CⅣ的含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组血清中CⅣ的含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑽与对照组相比,模型组、低剂量组和高剂量组血清PC-Ⅲ的含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,高剂量组血清中PC-Ⅲ的含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。⑾HE染色结果显示,对照组肝组织结构正常,与模型组相比,高剂量组肝纤维化程度有明显改善(P<0.05)。Masson染色结果显示,对照组仅汇管区和中央静脉有少许胶原纤维存在,同模型组比较,低剂量和高剂量组胶原纤维增生明显减轻。⑿Western blot检测肝脏组织中NF-Κb、IκBα表达结果显示,与模型组相比,低剂量组和高剂量组细胞核中NF-Κb表达呈剂量依赖性地降低(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组细胞质中NF-Κb和IκBα表达呈剂量依赖性地提高(P<0.05)。   结论:本研究结果证明在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中,丹参多酚酸盐能显著抑制肝脏纤维化的进展,减轻肝脏的损伤。这一效应同丹参多酚酸盐调节肝脏组织内NF-Κb和IκBα蛋白的表达密切相关。
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