林麝是我国一级珍稀濒危保护动物。林麝分泌的麝香是高级香料，也是我国和东亚地区传统的珍贵药材，因此林麝具有很高的药用价值和经济价值。因为过度捕杀以及生境的丧失，林麝种群数量锐减。我国具有多年的麝驯化和人工养殖历史，在1958年就开始了人工圈养以及保护野生的林麝，并且也取得了一定的成效，但是目前人工养麝的技术不完善，圈养的林麝很容易受细菌、病毒感染，化脓性疾病一年四季都有发生，呈散发形式，表现慢性病程，发病多，病程长，治愈率低，虽不及其他传染病那样来势凶猛，但死亡率高，约为麝群总死亡数的50％～70％，在疾病防治上一直没有取得很大突破。 IFN-γ是免疫系统的重要调节因子，主要由T细胞和NK细胞产生，能够全面促进体液免疫和细胞免疫。IFN-γ可增加T、B淋巴细胞的激活和IgG的Fc受体表达；显著增强抗原呈递细胞表达MHC类抗原，增强抗原呈递细胞与T细胞的相互作用，进而增强T细胞辅助抗体产生和辅助细胞毒T细胞产生的能力；诱导巨噬细胞产生体液免疫应答，使机体免疫力显著增强。在人和其他物种中，IFN-γ已用于病毒性感染和肿瘤等多种疾病的临床治疗。因此，为了应用IF-γ对林麝进行免疫治疗，提高林麝对外界环境的免疫水平，对此基因做了克隆、分析及原核、真核表达。 根据水牛IFN-γ基因的cDNA全序列为参考，设计两条克隆引物，从经ConA诱导的林麝外周血淋巴细胞(PBMC)总RNA为模板，运用RT-PCR技术扩增出编码林麝IFN-γ的基因并将其克隆到pMD18-T载体上。经筛选、菌落PCR鉴定、测序、序列分析，证实为林麝IFN-γ基因编码序列，全长498bp，编码166个氨基酸，与偶蹄目动物赤鹿、牛、羊的IFN-γ cDNA序列高度相似。将林麝IFN-γ重组到原核表达载体pGEX4T-1中，转化E.coli BL21，在IPTG诱导下实现了高效表达，SDS-PAGE分析得到约43KDa的蛋白质条带，与GST融合蛋白的预期分子量一致，表达量约占细菌总蛋白的26.9％。经NaOH法变性复性后，用GSTrap亲和柱对蛋白进行了纯化。 将林麝IFN-γ基因与真核表达质粒pPIC9K连接，转化E.coli JM109，通过菌落PCR、测序筛选构建正确的重组质粒，经线性化后电转化毕赤酵母GS115，再经G418抗性筛选、酵母菌落PCR鉴定，得到多个重组酵母，对这些酵母进行诱导表达、SDS-PAGE、反转录分析，在两株重组酵母经甲醇诱导4d的上清中检测到了约17.3KDa的诱导表达带，但表达量极低，这表明林麝IFN-γ在毕赤酵母中的表达是低水平的，而在大肠杆菌中的表达量相对较高。 本研究成果为进一步研究林麝IFN-γ的生物学活性及其临床应用奠定了基础，对林麝异地保护具有重要意义。