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目的:血小板及血小板制品是血液有形成分制品之一,血小板及其制品输注在临床成分输血中起着极其重要的作用。血小板输注的主要适应证是各种疾病导致血小板生成障碍引起的血小板减少或功能异常,常伴有严重出血。在止血过程中,血小板起着决定性的作用。血小板膜含有多种糖蛋白(Glycoprotein,GP),这些糖蛋白构成了血小板的各种受体,使血小板在输注后发挥其黏附、释放和聚集功能,从而使血小板起到止血作用。在整个止血过程中,血小板首先黏附、激活,这是止血过程的起始环节。在血小板膜上,血小板糖蛋白GPIb与GPⅤ和GPⅨ形成复合物,一起参与血小板的黏附作用。人类血小板同种抗原(human platelet alloantigens,HPA)是由血小板糖蛋白携带的一类特异性抗原,其基因具有单核苷酸多态性。HPA-2多态性位于血小板糖蛋白Ibα序列残基145位点,C(1a)/T(1b)变异使其编码的氨基酸由苏氨酸变为蛋氨酸,使血小板糖蛋白Ibα的氨基酸发生改变而影响血小板的黏附、聚集功能,从而影响血小板的止血效果。既往研究表明,血小板经输注后,血小板糖蛋白可引起同种免疫反应,引发血小板输注无效、输血后紫癜等,并且在日本人中,HPA-2b是引起血小板输注无效的主要原因之一。在国内,当给血小板输注无效患者输注HLA相配合的血小板时,仍有部分患者输注无效,且抗-HPA-2b是这类患者体内常见的血小板特异抗原抗体。目前,济南市用于临床输注的血小板全部来源于无偿献血人群。本文以济南市流动采血点无偿献血者为研究对象,通过分组对照分析性研究,探讨血小板糖蛋白Ibα基因HPA-2多态性在不同血型、不同年龄和不同性别无偿献血人群中的分布特点。
方法:本研究收集了济南市2007年11月至12月份流动采血点无偿献血者184人,其中男性111人,女性73人,18至21岁63人,22至29岁61人,30至52岁60人,包括A型44人,B型44人,O型55人,AB型41人,年龄最小18岁,最大52岁,平均26.4岁,均符合献血健康查体标准。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism,PCR-RFLP)扩增血小板糖蛋白IbαHPA-2基因,扩增产物经限制性内切酶Hin1Ⅰ消化后确定其基因型。实验结果用行×列表资料的卡方检验来比较分析HPA-2多态性基因型频率及等位基因频率在不同血型、不同年龄与不同性别无偿献血者之间的分布差异。研究对象与Hardy-Weinberg遗传平衡规律的符合程度用卡方检验,取检验水准α=0.05。
结果:在44名A型无偿献血者中,检测出2a/2a基因型42例,2a/2b基因型2例;在44名B型无偿献血者中,检测出2a/2a基因型40例,2a/2b基因型3例,2b/2b基因型1例;在55名O型无偿献血者中,检测出2a/2a基因型47例,2a/2b基因型8例;在41名AB型无偿献血者中,检测出2a/2a基因型40例,2a/2b基因型1例。血小板糖蛋白Ibα基因HPA-2多态性基因型频率与等位基因频率在A型与B型、A型与O型、A型与AB型、B型与O型、B型与AB型以及O型与AB型无偿献血者的分布无统计学意义。在111名男性无偿献血者中,检测出2a/2a基因型104例,2a/2b基因型7例;在73名女性无偿献血者中,检测出2a/2a基因型65例,2a/2b基因型7例,2b/2b基因型1例。HPA-2多态性基因型频率与等位基因频率在男性与女性无偿献血者中的分布无统计学意义。在63名18岁至21岁无偿献血者中,检测出2a/2a基因型59例,2a/2b基因型4例;在61名22岁至29岁无偿献血者中,检测出2a/2a基因型56例,2a/2b基因型4例,2b/2b基因型1例;在60名30岁至52岁无偿献血者中,检测出2a/2a基因型54例,2a/2b基因型6例,HPA-2多态性基因型频率与等位基因频率在三组不同年龄之间、在三组年龄组中不同性别之间的无偿献血者中的分布无统计学意义。
结论:在184名无偿献血者中,HPA-2b等位基因频率为4.4%,血小板糖蛋白基因HPA-2多态性基因型频率与等位基因频率在A型、B型、O型、AB型四种不同血型之间、在18岁至21岁、22岁至29岁、30岁至52岁三组不同年龄和不同性别之间的无偿献血者中的分布无显著性差异。