Carvacrol对两种重要植物病原真菌抑菌活性及其作用机制的初步研究

来源 :云南农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:yangminfeng_1
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稻瘟病和番茄灰霉病都是危害性非常大的真菌性病害,给生产带来巨大损失。目前为止还主要依靠化学防治,但是化学防治会造成环境污染以及使病菌产生抗药性,使防效大大减弱。因此,出于可持续发展以及绿色化学的需要,植物源杀菌剂越来越受到人们的重视,它不仅不会造成环境污染,而且也不易使病菌产生抗药性。Carvacrol是紫茎泽兰挥发物的主要成分之一。已有报道它是一种广谱的抗真菌剂及抗细菌剂,并且对人体无毒、无过敏。但未见关于Carvacrol对稻瘟病菌和番茄灰霉病菌的抑制作用及其作用机制的研究报道。本文初步研究了离体条件下Carvacrol抑制稻瘟病菌和番茄灰霉病菌的活性,及其抑菌机制。结果如下:1.采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了Carvacrol对稻瘟病菌和番茄灰霉病菌抑制作用,结果表明Carvacrol对两种菌表现出较强的抑制作用,通过实验测得抑制中浓度(EC50)分别为36.07mg L-1和10.65mg L-1。Carvacrol对两种菌孢子萌发的影响呈无规律变化,且与对照相比变化不显著。2.光镜和电镜观察表明,Carvacrol处理的稻瘟病菌和番茄灰霉病菌菌丝形态结构异常。对于稻瘟病菌,当Carvacrol浓度≥7.5mg L-1时,菌丝表现为扭曲、粗细不均、内含物固缩;当Carvacrol浓度≥30mg L-1时,菌丝局部和顶端膨大;当Carvacrol浓度≥60mg L-1时,菌丝分支增多、菌丝细胞出现大液泡、菌体细胞壁模糊不清、出现菌丝断裂的现象。对于番茄灰霉病菌,当Carvacrol浓度≥3.125mg L-1时,菌丝内含物分布不均、固缩,出现液泡;当Carvacrol浓度≥6.25mg L-1时,菌丝粗细不均、菌丝扭曲;当Carvacrol浓度≥12.5mg L-1时,菌丝分支增多、菌丝尖端缺陷、局部膨大、菌丝断裂;当Carvacrol浓度=25mg L-1时,菌丝断裂、空腔、畸形现象严重,菌丝细胞壁完全模糊不清。3.稻瘟病菌和番茄灰霉病菌经Carvacrol处理后,菌丝细胞膜的透性发生变化,造成菌丝体内含物的渗漏,具体表现为培养液的电导率随着处理时间和Carvacrol浓度的增大而增大。用考马斯亮蓝G-250比色法测定菌丝中可溶性蛋白质的含量,经Carvacrol处理一定时间后,发现两种菌菌丝中可溶性蛋白含量下降。4.实验对几丁质酶的活性以及N-乙酰葡萄糖胺的含量进行了测定,发现几丁质酶的活性和N-乙酰葡萄糖胺的含量随着时间的变化先升高后降低。5.实验采用皂化处理样品法提取并用高效液相色谱法测定菌丝体内麦角甾醇的含量。结果表明,随着Carvacrol浓度的升高,麦角甾醇的含量逐渐降低,表明细胞膜结构受到破坏。6.实验对过氧化氢酶活性进行测定,发现过氧化氢酶活性下降,解毒能力降低,菌体死亡。
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