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目的：探索肿瘤相关抗原H2-Calponin mRNA及其蛋白在肺癌、胃癌、鼻咽癌、肝细胞癌中表达分布,构建pIRES2-ZsGreenl-CNN2过表达载体,建立稳定转染CNN2过表达载体的肝细胞癌细胞系,探讨过表达CNN2对肝细胞癌细胞生物学行为的影响,为肝细胞癌的诊断及治疗提供理论基础。方法：(1)用免疫组织化学技术和原位RT-PCR技术检测四种不同癌组织中H2-Calponin蛋白及其mRNA的表达分布和定位情况；(2)将CNN2基因的真核表达质粒pIRES2-ZsGreenl-CNN2和空载体pIRES2-ZsGreenl质粒分别转化细菌、扩增提取纯化后,应用脂质体介导的方法分别转染体外培养的HepG2肝细胞癌细胞株,G418筛选阳性克隆并扩增培养传代；(3)实时荧光定量PCR技术检测HepG2/pIRES2-ZsGreenl-CNN2细胞中mRNA的表达；(4) Western-Blot法检测转染细胞中H2-Calponin蛋白的表达水平；(5)Wound healing(划痕修复实验)和Transwell(侵袭实验)分别检测细胞的转移和侵袭能力的改变,流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8实验绘制细胞生长曲线观察其增殖变化。结果：(1)免疫组织化学实验显示H2-Calponin蛋白主要分布在胞质；在肺癌、胃癌、鼻咽癌和肝细胞癌中阳性率分别为30.0%、27.5%、45.0%和51.8%,肝细胞癌组织阳性率最高(P<0.05)。原位RT-PCR显示H2-Calponin mRNA定位主要在胞核周围；H2-Calponin mRNA在肺癌、胃癌、鼻咽癌和肝细胞癌中表达阳性率分别为17.5%、10.0%、20.0%、50.0%,在肝细胞癌组织阳性率最高(P<0.05)。H2-Calponin在伴有转移的肝细胞癌组织中的阳性表达率高于无转移的肝细胞癌组织中的阳性表达率(P<0.05),但该蛋白在四种不同癌组织中的表达与患者的性别、年龄、及癌组织的病理分级等因素无关；(2)将pIRES2-ZsGreenl-CNN2表达载体转染入肝细胞癌HepG2细胞,通过G418筛选后经荧光定量PCR.和Western Blot实验分别检测其mRNA和蛋白的表达,结果显示阳性转染细胞株CNN2mRNA和蛋白表达明显增加,有统计学意义。(3)对转染前后的细胞观察表明,CNN2过表达并不影响细胞的增殖,但细胞迁移运动和侵袭能力增高。结论：(1)肝细胞癌组织高表达H2-Calponin蛋白和mRNA,提示H2-Calponin蛋白可能具有肝细胞癌特异性且与肝细胞癌是否伴有转移相关；(2)成功构建了稳定过表达CNN2的肝细胞癌细胞系；(3)CNN2蛋白过表达可以促进肝细胞癌HepG2细胞侵袭和转移。