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本文首先通过摇瓶实验对巴斯德毕赤酵母高效表达重组人白介素11的发酵条件、防止表达产物降解和聚合等方面进行了优化；根据优化的结果进行了补料分批发酵和放大,并对表达产物进行了鉴定。实验结果如下：1.考察了影响外源蛋白表达的因素,对发酵条件进行了优化,得到最佳培养及诱导条件为：接种量为10%,最佳种龄菌体密度OD600在10到20之间,诱导菌体密度OD600在120-150,诱导时间为70小时,甲醇浓度为0.5%,pH诱导前为6.0,诱导后为6.8,发酵温度为诱导前30摄氏度,诱导后降为25摄氏度,诱导48小时后降为22摄氏度。2.实现对外源蛋白表达条件的优化,减少目的蛋白的降解和聚合。对小罐试验的结果进行了放大,用德国贝朗公司D100型150L发酵罐进行了补料,分批发酵。最佳的实验条件为：甘油培养阶段：甘油浓度为40g/L,培养温度为30℃,pH6.0,溶氧40%。甘油流加阶段：等第一阶段甘油耗尽(溶氧突然跃升)即可进行甘油流加,50%甘油(含12ml/L PTM1)以24mL/L/h的速率进行补加,约4小时后,OD600大概在120-150左右,停止补加。甲醇流加阶段：等第二阶段结束后,饥饿半小时左右。等溶氧和pH均明显上升后,添加0.5%浓度的甲醇,待甲醇流量检测器读数稳定后,以该读数值为控制点进行100%甲醇(含12ml/LPTM1)反馈流加。诱导初期添加1%酵母粉、2%蛋白胨、0.3%干酪素、5mM EDTA、0.1M精氨酸及0.1%吐温20,温度控制在25℃,pH6.8,此后每隔24h添加一次0.3%干酪素和0.1%吐温20,诱导48小时后温度降为22℃。总诱导时间约70h。放罐时发酵总体积约90L,发酵上清约60L,蛋白表达总量在1.2g/L以上。该工艺共分三个阶段,约95h,整个过程pH用浓氨水控制,溶氧用空气和氧气混合控制。3.通过SDS-PAGE凝胶电泳法对表达产物进行了定性分析,结果表明表达产物与rhIL-11标准品具有相同的相对分子量。通过以上多方面的工艺改进后,重组人白介素11的总体表达量已比较稳定,大概在1.2g/L左右,单体含量大于0.7g/L