农杆菌介导抗虫(CpTI)基因的花生遗传转化与转基因植株的再生

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豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpeatrypsininhibitor,CpTI)是一种80个氨基酸的小分子多肽,是植物蛋白酶抑制剂中与抗虫关系最为密切的丝氨酸蛋白酶抑制剂的一种,具有广谱抗虫性.该文将豇豆胰蛋白酶抑制剂基因,通过农杆菌LBA4404的介导,转入中国花生主栽品种中,经过诱导分化及筛选压力选择等过程,最终获得再生植株.采用PCR检测及Southern杂交鉴定,表明豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因已整合到大部分再生花生植株的基因组.采用CTAB法提取再生植株叶片的植物总DNA,以目的基因两端序列为引物,进行再生植株总DNA的PCR检测.
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