DNA与有机试剂的共振光散射光谱研究与应用

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本论文在查阅大量文献的基础上,结合实验室的实验条件,选择共振光散射光谱法研究了DNA与一些有机小分子之间相互作用的共振光散射光谱特征,并根据共振光散射光谱信号改变值与DNA浓度呈正比的特点,建立了四种测定DNA的新方法。这些方法具有快速、灵敏等特点,应用于鱼精及酵母DNA含量的测定,结果令人满意。本论文共分为四章。第一章研究了甲基绿与脱氧核糖核酸在碱性条件下的共振光散射光谱特征,考察了影响因素和最佳反应条件。研究表明,甲基绿在pH=10.0的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中与鱼精DNA反应后在339nm处其共振光散射强度显著增强,且共振光散射强度增加值与加入的DNA的浓度呈良好的线性关系,据此建立了一种测定DNA的新方法。在pH=10.0的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,线性范围为400~1800μg/L,线性回归方程为:△I =-22.6602+56.1966C(C: μg/mL),相关系数为0.9990,最低检出限可达20.6μg/L,应用于鱼精DNA的测定结果令人满意。第二章研究了P-氯化蔷薇苯胺与脱氧核糖核酸的最佳反应条件,研究了它们之间相互作用的共振光散射特征,考察了体系的影响因素,建立了一种测定DNA的新方法。研究表明,在pH=7.0的三羟甲基氨基甲烷—盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,在594nm处P-氯化蔷薇苯胺与脱氧核糖核酸相互作用后产生共振光散射强度增强,共振光散射强度增强值与加入的DNA的浓度呈良好的线性关系,线性范围为200~1600μg/L,线性回归方程为:ΔI= -21.99 +236.5C(C:μg/mL),相关系数为0.9997,检出限为26.5μg/L,应用于酵母DNA的测定,结果令人满意。第三章研究了混合有机染料天青Ⅰ与脱氧核糖核酸的最佳反<WP=4>应条件,探索了体系在pH=10.0的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中的共振光散射特征,并考察了体系的影响因素,建立了一种测定DNA的新方法。方法的线性范围为200~600μg/L,线性回归方程为ΔI= -96.62+606.6C (C:μg/mL),相关系数为0.9998,检出限为11.2μg/L,应用于酵母DNA的测定结果令人满意。第四章研究了阴离子染料茜素红S(ARS)-十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)-脱氧核糖核酸(DNA)体系的共振光散射(RLS)及其分析应用。研究了体系RLS的光谱特征、影响因素和最佳反应条件,同时讨论了ARS- CTMAB- DNA相互作用的可能机理。在六次甲基四铵(HMTA)-HCl缓冲溶液(pH=8.0)中,ARS通过CTMAB的桥梁协同作用与DNA反应形成了大的分子聚集体,使体系的RLS增强。在最佳条件下,体系的△IRLS与yDNA在25-800μg/L范围内呈线性关系,其线性回归方程为ΔI=57.632+412.76C(C:μg/mL),相关系数r=0.9991,DNA检测限为11.3μg/L。该方法简便、快速、具有较高的灵敏度和准确度,应用于合成样品中DNA的测定,结果令人满意。
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