目的：我们在动物实验中，建立大鼠胃切除手术创伤的模型，通过滴注中药芪黄煎剂小肠内干预后，观察健脾通里中药芪黄煎剂对肠淋巴细胞归巢过程中的分子数量及表达的影响。揭示芪黄煎剂对肠黏膜免疫屏障功能的保护是通过淋巴归巢实现的，为肠屏障功能障碍及其危重病的防治提供应用基础研究。方法：通过建立假手术模型和大鼠胃切除的手术模型，将其随机分为三组：（1）假手术组：仅切开大鼠的腹部正中，然后将其缝合，不切除胃。术后继续进食水，不给予肠内营养能全素和芪黄煎剂。（2）对照组：大鼠胃切除手术创伤模型建立后，置于代谢笼内，清醒后笼内自由活动，手术当天禁食。从术后24小时起，通过微量注射泵实施肠内营养。肠内营养制剂选用能全素（荷兰，Nutricia公司）。滴注前，先滴注6ml生理盐水。疗程持续1周。（3）芪黄煎剂组：滴注的营养制剂、方法、热量、疗程均同单纯肠内营养组，同时加滴注中药芪黄煎剂。具体的方法是在滴注营养液能全素前通过肠内输液泵给予6ml芪黄煎剂匀速持续注入小肠内，疗程持续1周。疗程结束后，处死大鼠，分离标本，观察和检测肠淋巴细胞归巢过程分子的表达：（1）归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）检测：采用流式细胞术检测淋巴液中归巢受体表达数量，计算其单个核细胞的阳性细胞率；采用RT-PCR荧光定量检测引流淋巴液中归巢受体α4β7、L-selectin、LFA-1基因表达。（2）归巢配体（MAdCAM-1、ICAM-1）检测：采用免疫组化法，分离出PP结，常规石蜡切片，进行免疫组化图像分析，测定阳性细胞平均积分光密度值；采用RT-PCR荧光定量检测引流淋巴液中的淋巴归巢配体MAdCAM-1、ICAM-1基因表达。资料收集与分析①流式细胞仪我们采用488nm氢离子激光为激发光,接收通道SS(侧向散射)、FS(前向散射)，观察归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）阳性表达数量变化，使用Cell-quest软件分析数据；②免疫组化法均采用Image-ProPlus5.1自动图像处理系统，通过测定阳性细胞平均积分光密度值来进行免疫组化图像分析。③RT-PCR采用ABIPrism7900型实时荧光定量分析，包括扩增曲线、熔解曲线以及相对表达量。本次实验所使用的分析方法为：相对定量分析（relativequantificationstudy）,分析所采用的指标为：2-△△Ct。统计学方法应用SPSS17.0统计学软件进行处理,各组样本间数据先进行方差齐性检验，采用的是Levene法，若方差齐，就用单因素设计方差分析，进一步采用t检验进行样本比比较；若方差不齐，即采用非参数样本检验。用均数±标准差(x±s)表示实验所得数据，以P>0.05判定差异有无统计学意义。结果肠淋巴细胞归巢过程分子表达观察检测：（1）归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）检测：①淋巴液中归巢受体分子阳性表达数量检测：大鼠造模后一周，芪黄煎剂组和对照组的归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）细胞阳性表达数百分比较假手术组均有所下降，表明手术创伤后，肠道粘膜免疫屏障受损，淋巴液中归巢受体数量减少。其中对照组的归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）细胞阳性表达数百分比与假手术组受体阳性表达数目比较，差异具有明显显著性（P<0.01），而芪黄煎剂组的归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）细胞阳性表达数百分比与假手术组受体阳性表达数目比较，差异也具有统计学意义（P<0.01）;与对照组相比，芪黄煎剂组受体数量增多，但是差异不具有统计学意义（P>0.05），这说明芪黄煎剂干预后，使淋巴液中归巢受体α4β7、L-selectin、LFA-1细胞阳性表达数显著增多，诱导淋巴细胞聚集，达到修复粘膜免疫功能。②淋巴液中归巢受体分子基因表达量检测：大鼠肠淋巴液肠淋巴归巢分子（α4β7、L-selectin、LFA-1）mRNA相对表达量：芪黄煎剂组和对照组的归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）mRNA相对表达量较假手术组均低，差异都具有明显显著性（P<0.01）;芪黄煎剂组与对照组归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）mRNA相对表达量比较具有显著意义（P<0.05）,这说明经中药干预后，能促进淋巴液中归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）mRNA的相对表达数量，从而使淋巴归巢受体游出与配体结合黏附在上皮内与固有层上。另外，比较发现，三组的淋巴液归巢受体mRNA相对表达量中，受体LFA-1表达数量较α4β7、L-selectin显著增多，差异具有明显显著性（P<0.01），表明在归巢过程中后期黏附起到主要作用的受体是LFA-1。（2）归巢配体（MAdCAM-1、ICAM-1）检测：①PP结中肠淋巴归巢配体（MADCAM-1、ICAM-1)的阳性表达数:大鼠造模后一周，PP结中肠淋巴归巢配体（MADCAM-1、ICAM-1)的阳性表达数，芪黄煎剂组、对照组与假手术组比较，差异具有显著性（P<0.01），其中芪黄煎剂组与对照组比较差异也具有显著意义（P<0.01），这表明明在胃切除后，PP结中肠淋巴归巢配体（MADCAM-1、ICAM-1)，经肠内营养和中药干预，中药芪黄煎剂组更有效地促进了PP结中肠淋巴归巢配体有效表达数目且与归巢受体发生黏附，对肠道黏膜免疫屏障修复有明显的调节作用。②大鼠PP结肠淋巴归巢分子配体（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量：芪黄煎剂组和对照组的归巢分子配体（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量较假手术组均低，表明创伤导致上皮内与固有层黏膜损害，使黏附分子mRNA表达减少明显。其中对照组的归巢分子配体（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量与假手术组比较，差异具有明显显著性（P<0.01），而芪黄煎剂组的归巢分子配体（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量与假手术组比较，差异也具有统计学意义（P<0.01），芪黄煎剂组与对照组归巢分子配体（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量比较升高且具有统计意义（P<0.01）,这说明经中药干预后，增加黏附分子（MADCAM-1、ICAM-1）mRNA相对表达量,修复上皮内与固有层的黏膜免疫屏障，促使黏附分子的游出。另外，我们发现归巢配体MADCAM-1、ICAM-1比较中，MADCAM-1的mRNA表达明显高于ICAM-1，表明在归巢过程中，受体α4β7、L-selectin的地址素都是MADCAM-1，受体LFA-1与配体ICAM-1的mRNA表达只是在晚期表达，且表达含量远不及α4β7-MADCAM-1、L-selectin-MADCAM-1的mRNA表达。结论胃切除手术创伤后，小肠内滴注健脾通里中药芪黄煎剂干预，能增加血液淋巴细胞表面归巢受体（α4β7、L-selectin、LFA-1）数量及mRNA表达含量，促使在中枢淋巴器官(胸腺、骨髓等)和肠道自身生成的初始淋巴细胞通过诱导部位(PP结)致敏，再次穿越高内皮微静脉，回到血液循环，促进黏附分子的游出；同时也能增加肠黏膜效应部位的肠固有层或上皮内归巢配体（MAdCAM-1、ICAM-1）的数量及mRNA表达含量，使黏膜地址素更能捕获归巢受体，归巢受体与配体高表达结合后，激活淋巴组织中的T淋巴细胞的分化、成熟和增殖、并间接地促进淋巴组织中B细胞的增殖、活化，从而改善胃切除术后肠黏膜免疫屏障功能。