鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡的急性、高度接触性的呼吸道和泌尿生殖道疾病。鸡传染性支气管炎病毒的常规检测方法是利用鸡传染性支气管炎病毒总蛋白做为抗原，通过酶联免疫吸附反应(ELISA)来检测IBV抗体。然而，病毒总蛋白的制备繁琐耗时。鸡传染性支气管炎的病毒中，病毒结构蛋白包括纤突蛋白(S)、核蛋白(N)、膜蛋白(M)。其中，S蛋白与中和作用相关。因此，本试验克隆并表达S的部分保守基因片段(Sp)，建立了以Sp蛋白为抗原的IBV抗体间接ELISA检测方法，为IBV ELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。 以提取的IBV总RNA为模板，根据原核表达载体pET-His设计含有BamHI和HidⅢ酶切位点的引物，通过RT-PCR的方法克隆扩增出Sp基因。将扩增出的Sp基因以及空表达载体pET-His进行BamHI和HidⅢ双酶切，然后将Sp基因克隆于原核表达载体pET-His。将重组表达载体质粒转入大肠杆菌BL21进行诱导表达。重组蛋白包涵体经离心收集、超声破碎、变性、洗涤、溶解、纯化后获得较纯的Sp蛋白。将得到的Sp蛋白作为抗原，建立IBV抗体的间接ELISA检测方法。 结果显示Sp基因全长606bp，编码202个氨基酸序列。表达产物经SDS-PAGE分析，证明目的蛋白以包涵体的形式存在，大小约为22kDa。以Sp蛋白作为抗原建立的IBV抗体间接ELISA检测方法经实验证明，具有简便、经济、快速的特点。