内蒙古马铃薯疮痂病病原菌毒素Thaxtomin A产量的差异研究

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内蒙古是我国马铃薯种薯生产和商品薯机械化生产大省。马铃薯疮痂病流行呈加重趋势,对我区乃至全国马铃薯产业威胁严重。本研究选取内蒙古地区已报道的6种疮痂病病原菌为研究材料,其中分布最广泛的菌种选取3株,其余菌种各选1株,共计8株。本实验利用MLSA(Multilocus Sequence Analysis,多位点序列分析)方法确定了菌株种类;通过鉴定各菌株的致病基因岛类型及测定各菌株对小萝卜苗生长的抑制率确定了各菌株的致病性;通过测定各菌株Thaxtomin A的产生量,分析其产量与对小萝卜苗生长抑制率的相关性,测定与Thaxtomin A合成和调控相关基因的表达水平,来分析各菌株Thaxtomin A产生量差异的主要原因,从而解释不同病原菌致病力的差异。本研究表明,不同病原菌产生毒素能力不同,这将为制定不同病原菌导致的疮痂病的综合防控策略提供一定的理论依据。主要结果如下:(1)MLSA分析结果确认8株菌株的种类。其中3株为Streptomyces galilaeus,其余各菌株分别为S.scabiei、S.europaeiscabiei、S.turgidiscabies、S.diastachromogenes和S.bobili。(2)8株菌株均存在致病性。所用菌株均能使鲜马铃薯片产生木栓化病斑,并抑制白萝卜幼苗生长。(3)8株致病菌均含有txtAB、nec1和tomA这3个常见的致病基因。通过对病原菌DNA进行扩增,发现各菌株均能扩增出相关片段。(4)8株致病菌中,7株菌株的致病岛类型为典型PAI,1株致病岛类型为PAISt。通过对病原菌DNA进行扩增,发现7株菌株均能扩增出典型PAI的TR2区特异基因lant C,1株菌株能扩增出PAISt的特异基因int St。(5)8株致病菌毒素Thaxtomin A的产量不同。方差分析显示,S.galilaeus的3个菌株产生毒素量无显著差异,而其余菌株S.scabiei、S.turgidiscabies和S.bobili的毒素产量显著高于S.europaeiscabiei和S.diastachromogenens的毒素产量(P<0.05)。同时,毒素的平均产量与小萝卜苗的平均长度显著负相关(P<0.01)。(6)转录水平下无法解释各菌株毒素Thaxtomin A产量差异的原因。对不同菌株的毒素Thaxtomin A合成及调控相关的基因txt AB、txt C、txt D、txt E、txt H、txt R、tom A、nec1、ceb R、ceb E、msi K和bgl C进行基因表达水平分析。结果显示,S.galilaeus种内的3个菌株在txt AB、txt C和txt R的表达水平上存在显著差异(P<0.05),其余基因的表达水平差异不显著。其它各菌株间的Thaxtomin A合成及调控基因的表达水平无显著差异。
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