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长春瑞滨是一种半合成的长春花属生物碱,是抑制微管蛋白聚合的细胞周期特异性药物,其抗肿瘤疗效确切,被广泛用于治疗非小细胞肺癌和进程性乳腺癌。长春瑞滨同传统化疗药物一样,存在选择性不强,毒副作用大等问题,限制了临床应用;纳米胶束载药系统可以通过被动靶向或主动靶向将药物运输至肿瘤细胞,从而降低药物毒性提高药物疗效。本文对长春瑞滨纳米胶束(用M-VRL表示)与国内已上市制剂长春瑞滨注射液(用F-VRL)进行了系统深入的临床前药代动力学研究,并考察M-VRL与F-VRL的异同。从而更准确地预测长春瑞滨纳米胶束在人体内的变化过程,更合理地评价注射用长春瑞滨纳米胶束的有效性和安全性,为临床研究提供详实可靠的科学依据。本项目是国家973计划“纳米药物载体增强药物导向型体内过程的研究”课题(2006CB933303)的基础研究内容之一。从以下五方面获得了具有科学意义和应用价值的研究结果:一、长春瑞滨的细胞毒性测定与药效评价研究以普通长春瑞滨注射液(F-VRL)作对照,用MTT法对构建的长春瑞滨纳米胶束(M-VRL)的细胞毒性进行了研究,并建立了4T1鼠源乳腺癌细胞原位模型对M-VRL和F-VRL的药效进行了评价。结果表明:与F-VRL相比,M-VRL对肿瘤细胞的杀伤力更强,抑瘤作用更明显。二、血浆样品中长春瑞滨的LC-ESI/MS分析方法的建立通过对色谱和质谱条件进行优化,建立了测定血浆样品中长春瑞滨的高效液相色谱-质谱联用(LC-ESI/MS)法,并对分析方法进行确证。结果表明:血浆样品中长春瑞滨的LC-ESI/MS分析方法与文献报道的方法相比,灵敏度更高,专属性更强,分析速度更快,能够满足药物动力学研究中高灵敏度和高通量的需要。三、长春瑞滨在大鼠体内的药物动力学研究本论文采用LC-ESI/MS法测定了大鼠血浆中长春瑞滨的浓度,进行M-VRL和F-VRL静脉注射给药后在大鼠体内的药代动力学研究,结果显示:M-VRL和F-VRL静脉注射给药的体内代谢过程符合二室模型。四、长春瑞滨在大鼠体内的排泄研究分别进行M-VRL和F-VRL两种药物的初步探索性排泄研究,利用LC-ESI/MS分析方法,考察大鼠尿液和粪样中长春瑞滨的经时变化规律;结合药代动力学结果,为今后进一步排泄机制研究提供信息。五、长春瑞滨在大鼠和荷瘤小鼠体内的组织分布研究。建立高效液相色谱-串联质谱(LC-ESI/MS/MS)法用于测定大鼠和荷瘤小鼠经尾静脉注射给予M-VRL和F-VRL后不同时刻组织中长春瑞滨的浓度,并进行了方法确证。通过比较M-VRL和F-VRL在大鼠和荷瘤小鼠体内组织分布的差异,进而对长春瑞滨在大鼠和荷瘤小鼠体内的靶向性以及在各组织中的蓄积情况进行评价。总之,本文采用建立的LC-ESI/MS和LC-ESI/MS/MS分析方法,系统研究了长春瑞滨静脉注射给药后在动物体内的动力学、分布及排泄特征;考察了长春瑞滨在肿瘤组织中分布的靶向性,为该药物的临床开发提供了可靠的科学依据。本文建立的生物样品中长春瑞滨的LC-ESI/MS和LC-ESI/MS/MS分析方法,具有灵敏度高、专属性强、快速简便的优点,将对长春瑞滨的体内药物分析方法的探索提供极具价值的启示。