前言 肿瘤发展过程中自由基含量是一个复杂的问题，至今尚无定论。近年来，由于自由基科学的不断进展，自由基与宫颈癌的关系也受到人们的关注。 脂质过氧化物(LPO)是指磷脂、甘油三脂、胆固醇脂及游离脂肪酸等脂类中的不饱和脂肪酸与自由基发生的过氧化过程中生成烷氧自由基(RO·)、过氧自由基(ROO·)、有机氢过氧化物(ROOH)和激发态羰基(RO*)等产物的总称。LPO在适宜条件下激发连锁反应，可产生多种自由基，造成生物膜、蛋白质、DNA等损伤，从而引起各种疾病发生，尤其与肿瘤关系密切。LPO在体内的含量直接反映了脂质过氧化的程度和速率。同时也间接反映了组织细胞损伤的程度。超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是体内清除自由基的两种重要酶。SOD、GSH-Px在体内含量的高低反映了机体抗氧化能力的强弱。 目前就LPO、SOD、GSH-Px在不同肿瘤中的检测已有了一些报道。国外学者Ber等研究发现胃腺癌组织中GSH-Px活性显著高于正常人。Sun Y等研究结果表明肝癌的发生可能与SOD有关。国内也有人在不同肿瘤中对自由基作了研究。陈湘报道了35例膀胱肿瘤患者血清中LPO含量显著高于正常对照组。而SOD低于正常对照组。李灿芬研究结果显示，子宫肌瘤患者血清中SOD活性较健康妇女明显降低，刘爱民报道了32例宫颈癌组织中LPO的含量及SOD活性明显高于癌旁组织。但就自由基在早期宫颈癌中的研究比较罕见。 本研究为进一步了解自由基在宫颈癌变过程中所起的作用，就LPO、SOD、GSH-Px三者在早期宫颈癌组织中的含量进行了检测，探讨自由基与早期宫颈癌的关系。实验材料与方法 1病例及组织标本 病例选自2002年1月至2003年4月中国医科大学附属第一医院妇科住院患者手术切除的标本33例及同源癌旁正常组织标本33例。年龄30-53岁，平均41.4岁。I。9例，1 b 21，例11。3例。i嘀床分期按国际妇产科联盟FIGO 2000分期标准。21例正常对照组为门诊妇女病普查(少数要求上环)且宫颈光滑者，年龄为33一54岁，平均43.5岁。所有病例均经病理证实，均无近期放射线接触史及全身重要脏器疾病史。以上组织标本均在离体1小时内置一40℃条件下待测。 2主要实验试剂 1.ommol/L GSH溶液，1.25mrnoFLHZOZ溶液，O.32moFLN气HPO4溶液，0.Zmol/L磷酸二氢钾溶液，0.4moUL EDTA一NaOH缓冲液，7.5~。FL氯化硝基四哩氮蓝(NBrr)，黄嘿吟氧化酶，混合底物缓冲液，叠氮磷酸盐缓冲液，偏磷酸沉淀液，DTNB显色液，SOD标准液。 3实验仪器与设备 可见光分光光度计，恒温水浴箱，离心机，电磁搅拌器，分光光度计。 4组织匀浆液的制作 分别取冷冻的癌组织、癌旁组织及正常宫颈组织后称湿重(平均82士21mg)，用冰生理盐水洗涤3次，剪碎后置于玻璃匀浆器中。加人10倍体积预冷的0.05moFL pH7.4磷酸盐缓冲液(内含‘10一4m0UL EDTA，0.03mol/L KCI)，于4℃条件下充分匀浆，ZOO0r/min，匀浆smin，匀浆液3000r/min离心10而n，取上清液备用。 5检测方法 LPO含量测定采用TBA比色法;SOD及其同功酶活性测定采用黄膘吟氧化酶法;GSH一入活性测定采用DTNB直接显色法。 6统计学分析 采用t检验，应用SPSS统计软件(n .5)进行处理。实验结果 1早期宫颈癌组织中的LPO含量明显高于癌旁组织及正常宫颈组织(P<0.05;P<0.01)，癌旁组织与正常宫颈组织中LPO含量差异不明显(P>0·05)。 2早期宫颈癌组织中的T一SOD、CuZn一SOD、GSH一Px活性显著低于癌旁组织及正常宫颈组织(P<0.05;P<0.01)，Mn一SOD活性明显高于癌旁组织及正常宫颈组织(P<0.05);而癌旁组织与正常宫颈组织之间无显著性差异(p>0.05)。讨论 自由基广泛存在于生物界，目前已认识到它的生物活性具有两重性，既有生理作用，又是许多疾病的病理基础。在生理情况下自由基不断在产生，但也不断被清除，使自由基浓度保持在产生与清除的动态平衡中。在病理状态下，自由基大量产生并作用于细胞膜的脂类，引起脂质过氧化链锁反应，造成生物膜、蛋白质、DNA等损伤，从而引起各种疾病发生，尤其与肿瘤关系密切[‘一’〕。脂质过氧反应是真核细胞的独特反应。脂质过氧化链锁反应产物为LPO，LPO直接或间接作用是自由基对生物损害的主要原因。SOD、GSH一Px是体内清除自由基的两种重要酶。近年来研究表明，自由基在肿瘤的启动、促进和转变演进中起重要作用，可以造成细胞多方面的损伤川。国外学者Ber等研究发现胃腺癌组织中GsH一Px活性显著高于正常人。SunY等研究结果表明，肝癌的发生可能与SOD有关。国内也有人在不同肿瘤中对自由基做了研究。唐伟琼等报道宫颈癌组织中LPO含量明显高于健康对照组，SOD、GSH一Px活性显著低于健康对照组。本研究结果表明，早期宫颈癌患者组织内LPO含量与癌旁组织及正常宫颈组织相比明显增高，T一SOD、Cuzn一SOD及GSH一Px活性明显降低，其差异有显著性意义，与文献报道一致。 宫颈癌的确切病因及发病机制目前虽未完全明了，但一般认为其很复杂，非