论文部分内容阅读
目的:肿瘤的辐射耐受制约了放疗疗效,第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂(Second mitochondria-derived activator of caspase,Smac)蛋白类似物可明显提高辐射诱导的肿瘤细胞凋亡,有望成为新型肿瘤辐射增敏药物。本研究旨在探讨新型Smac蛋白类似物ANTP-SmacN7融合肽对肺癌细胞系H460的辐射增敏作用。 方法:(1)取对数生长期肺癌H460细胞,分为空白对照组,单纯照射组,ANTP-SmacN7组和照射联合ANTP-SmacN7组,单纯照射组给予0、2、4、6 Gy照射,照射联合ANTP-SmacN7组中ANTP-SmacN7的浓度为20μmol/L。(2)WST-1测定H460细胞的增殖。(3)流式细胞仪测定细胞处理后24和48h的细胞凋亡率。(4)Western blot实验检测caspase3和cleaved caspase3的表达水平。 结果:(1)ANTP-SmacN7融合能够顺利进入细胞,且能够增强H460细胞的辐射敏感性(F=25.1,P<0.01,增敏比为1.86)(2)照射联合ANTP-SmacN7可明显降低H460细胞的克隆形成率(x2=45.2,P<0.01;x2=40.3,P<0.01),提高cleaved caspase3的表达量,促进caspase3的活化,增加辐射诱导的细胞凋亡率。 结论:ANTP-SmacN7融合肽可明显提高H460细胞的辐射敏感性,促凋亡作用这一特性与抑制XIAP的mRNA转录和促进cIAP-1的降解以及caspase的激活有关,ANTP-SmacN7作为一种新的Smac蛋白类似物有望用于肿瘤的辐射增敏治疗。