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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,已成为当今女性的“第一杀手”。临床上常用的外科手术以及放疗、化疗等手段均面临诸多问题。小干扰RNA(siRNA)药物是近年来兴起的一种新型药物,为目前多种束手无策的疾病如乳腺癌等的治疗带来了新的曙光。然而,制约siRNA药物发展的最关键因素是它的给药系统,特别是发展靶向特异输送siRNA药物到达癌细胞和癌组织的技术；解决该问题的关键是发展能克服siRNA系统给药的屏障,以及将siRNA药物特异高效输送到癌组织和癌细胞的靶向给药系统。大量研究表明约有25%-30%乳腺癌患者的癌细胞表面人类生长因子受体2(human growth factor receptors2,Her2)过度表达。本论文利用Her2单链片段抗体既具有抗原亲和活性,又具有分子小、易穿透细胞外间隙到达深部的肿瘤细胞的特点,构建了Her2靶向的小干扰RNA药物输送系统,高效地将siRNA输送到Her2阳性乳腺癌,抑制Her2阳性乳腺癌的生长。第一部分：制备了可与乳腺癌细胞表面高表达Her2受体特异性结合的Her2单链片段抗体融合蛋白,包括Her2单链片段抗体鱼精多肽融合蛋白和易化学键合的Her2单链片段抗体。上述融合蛋白均在大肠杆菌中成功表达,并利用Ni-NTA与融合蛋白上的His-tag结合,得到了纯度较高的目的蛋白。第二部分：利用了Her2单链片段抗体鱼精多肽融合蛋白结合siRNA,将siRNA靶向输送到Her2阳性乳腺癌细胞,并抑制了Her2阳性乳腺癌的生长。以DNMTs基因为靶基因,通过该融合蛋白靶向输送siDNMTs到Her2阳性的BT474细胞,有效沉默了目的基因DNMTs的表达,使抑癌基因RASSF1A的启动子区发生去甲基化而被再次激活,从而抑制肿瘤细胞的增殖。经尾静脉注射融合蛋白与siDNMTs的复合物,显著抑制了裸鼠原位植入Her2阳性乳腺癌的增殖。第三部分：在聚乙二醇-聚乳酸嵌段聚合物为主要材料的siRNA内米给药系统的基础上,通过Her2单链片段抗体的修饰,获得了靶向输送siRNA到Her2阳性乳腺癌的纳米给药系统,促进了Her2日性乳腺癌细胞对siRNA的摄取。经Her2单链片段抗体修饰的纳米给药系统包载siPLKl,尾静脉注射后,由于其纳米效应在肿瘤组织被动富集,并进而通过受体-配体相互作用主动靶向肿瘤细胞,从而实现siRNA药物被动靶向和主动靶向输送的结合,更高效输送siRNA药物到Her2阳性的乳腺癌细胞和组织,有效沉默癌基因PLK1的表达,进而促进肿瘤细胞的凋亡,抑制了肿瘤生长,在动物水平提高了乳腺癌的治疗效果。