【摘 要】
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犊牛腹泻是犊牛在诸多因素的影响下,出现消化不良、腹泻、脱水、消瘦等临床特征的消化道疾病,严重且持久的腹泻会导致犊牛生长发育迟缓、死亡率增加。该病是犊牛的常见病、多发病,也是牛场经济损失的主要原因之一。犊牛腹泻分为感染性腹泻和非感染性腹泻,感染性腹泻由病毒、细菌、寄生虫等致病性病原微生物引起,非感染性腹泻多由营养、应激、环境卫生等引发。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛轮状病毒（BRV）、牛冠状病毒（
【基金项目】
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宁夏回族自治区东西部科技合作项目“优质肉牛精准化养殖技术研究与示范”（2017BY078）课题“肉牛健康养殖技术集成与示范”; 宁夏回族自治区奶牛育种专项“优质高产奶牛安全健康养殖技术研究与示范”（2019NYYZ05）
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犊牛腹泻是犊牛在诸多因素的影响下,出现消化不良、腹泻、脱水、消瘦等临床特征的消化道疾病,严重且持久的腹泻会导致犊牛生长发育迟缓、死亡率增加。该病是犊牛的常见病、多发病,也是牛场经济损失的主要原因之一。犊牛腹泻分为感染性腹泻和非感染性腹泻,感染性腹泻由病毒、细菌、寄生虫等致病性病原微生物引起,非感染性腹泻多由营养、应激、环境卫生等引发。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛轮状病毒（BRV）、牛冠状病毒（BCoV）是常见的引发犊牛腹泻的病毒,而牛星状病毒（BAstV）、牛凸隆病毒（BToV）、牛嵴病毒（BKoV）、牛细小病毒（BPV）、牛诺如病毒（BNoV）等也逐渐被关注。为快速检测BVDV、BRV、BCoV、BAstV、BToV、BKoV引发的犊牛腹泻病例,针对6种病毒的保守区域设计引物,建立了可同时检测6种病毒的多重PCR检测方法,该方法特异性、敏感性良好,可用于检测临床样品。为具体了解宁夏地区犊牛病毒性腹泻的流行病学状况,通过本试验构建好的多重PCR检测方法和已报道的单一 PCR检测方法,对犊牛粪便进行BVDV、BRV、BCoV、BAstV、BToV、BKoV、BNoV、BPV的分子生物学检测。结果表明,宁夏地区犊牛粪便中BRV、BCoV、BAstV、BToV、BKoV、BNoV、BPV 的检出率分别为 14.23%、5.69%、14.23%、10.57%、26.02%、4.47%、2.44%,腹泻病毒的感染呈现复杂性、多样性。遗传进化分析阳性样品与NCBI中的参考毒株核酸序列一致性高,均在所属病毒群分支上,进一步表明宁夏地区犊牛群中流行 A 群 BRV、BCoV、BAstV、BToV、BKoV、BNoVGⅢ.2、BPV1。为了解宁夏地区犊牛粪便中病毒组成状况,采集6月龄以内犊牛的粪便,利用病毒宏基因组学技术分别对3份健康组、3份腹泻组混合样品进行检测。测序结果注释到小RNA病毒科、星状病毒科、小双RNA病毒科、杯状病毒科、托巴套氏病毒科、呼肠孤病毒科、冠状病毒科等26个病毒科;注释到与犊牛腹泻有关的病毒属有博匹韦病毒属、肠道病毒属、嵴病毒属、匈牙利病毒属、纽布病毒属、诺如病毒属、小双RNA病毒属、哺乳动物星状病毒属、轮状病毒属、凸隆病毒属、β冠状病毒属、瘟病毒属。犊牛粪样病毒宏基因组学结果表明,宁夏地区犊牛粪便中病毒组成复杂、多样,且存在多种与腹泻有关的病毒。本研究分析了宁夏地区犊牛粪便内病毒组成状况,掌握了病毒性腹泻的分子学流行状况,为犊牛病毒性腹泻的病原学诊断提供参考,同时为犊牛腹泻的防控提供数据支撑。
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