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[目的]构建初诊断2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆miRNAs差异表达谱,验证比较初诊断T2DM病例组与对照组血浆中miRNAs的差异表达,综合分析T2DM传统危险因素和经验证差异表达的miRNAs的对T2DM影响,探讨血浆miRNAs水平对T2DM的诊断价值,为表观遗传因素在T2DM发生发展的作用及其机制研究提供新证据。[方法]1.采用miRNAs芯片表达谱实验技术检测miRNAs在12例样本(初诊断T2DM患者和健康对照各6例)血浆中的差异表达情况。根据芯片结果和生物信息学分析证据,确定挑选有显著性差异的miRNAs以进一步开展GO、pathway分析和后续的人群验证分析。2.采用病例对照研究设计,从5个疾病监测点中抽取40例初诊断T2DM患者,按照性别、年龄(±5岁)进行成组匹配,选取40例非T2DM人群作为对照组。采用SYBR Green法进行实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR),对筛选的差异表达miRNAs进行验证。应用Logistic回归模型进行差异表达miRNAs与T2DM患病风险相关性分析。建立不同风险预测模型,以不同模型受试者工作曲线(ROC)下面积(AUC)初步判断模型的诊断能力。3.应用受试者工作曲线(ROC),建立不同风险预测模型,通过计算不同模型ROC曲线下面积(AUC)来初步判断指标的诊断能力。[结果]1.构建了初诊断T2DM血浆miRNAs差异表达谱,筛选出122个在病例组与对照组中差异表达的miRNAs,其中表达水平升高的miRNAs有30个,表达水平降低的miRNAs有92个。经芯片表达谱与在线数据库预测联合交集,筛选得到差异表达miRNAs 14个,其中表达水平升高的miRNAs有5个,表达水平降低的miRNAs有9个。2.血浆中hsa-mi R-185-5p、hsa-mi R-328-5p在病例组表达较对照组高,差异有统计学意义(p<0.05),hsa-mi R-16-5p、hsa-mi R-17-5p、hsa-mi R-188-5p和hsa-mi R-7150在病例组和对照组表达差异没有统计学意义(p>0.05)。其中,hsa-mi R-185-5p与FPG、HOMA-IR水平呈正相关(r=0.233,p<0.05),hsa-mi R-328-5p与血脂、胰岛素相关指标之间没有显著的相关性。3.hsa-mi R-185-5p、hsa-mi R-328-5p均与T2DM患病风险相关。血浆hsa-mi R-185-5p高表达发生T2DM的风险为正常表达的1.392倍(95%CI:1.074~1.804,p=0.012),血浆hsa-mi R-328-5p高表达发生T2DM的风险为正常表达的1.133倍(95%CI:1.008~1.273,p=0.037)。进一步调整各相关常见危险因素后,hsa-mi R-185-5p、hsa-mi R-328-5p也与T2DM患病风险相关。4.hsa-mi R-185-5p对T2DM诊断的灵敏度为0.4,特异度为0.925,AUC值为0.644(95%CI:0.523~0.766,p=0.026),对应诊断界值为2.766。hsa-mi R-328-5p对T2DM诊断的灵敏度、特异度分别为0.65、0.625,构建的模型AUC为0.638(95%CI:0.516~0.760,p=0.033),其对应诊断界值1.267。5.并联开展hsa-mi R-185-5p和hsa-mi R-328-5p对T2DM诊断试验的灵敏度0.675、特异度0.60,阳性预测值0.63、阴性预测值0.65。AUC值为0.646(95%CI:0.525~0.767,p=0.025)。6.应用hsa-mi R-185-5p、hsa-mi R-328-5p,吸烟、饮酒、高血压、中心性肥胖和血脂异常等常见T2DM危险因素构建logistic回归风险预测模型:常见T2DM危险因素构建的模型AUC值为0.780(95%CI:0.674-0.865,p<0.001),模型中加入血浆hsa-mi R-185-5p表达水平后,AUC值增加到0.823(95%CI:0.728-0.917,p<0.001);将血浆hsa-mi R-328-5p表达水平加入常见危险因素模型后,AUC值增加到0.801(95%CI:0.702-0.900,p<0.001)。[结论]1.从初诊断T2DM血浆mi RNAs表达谱芯片到人群q PCR验证,mi RNAs均存在异常表达,提示可能存在与糖尿病筛查和诊断有关的mi RNAs。芯片表达谱联合生物信息学分析有助于差异表达mi RNAs进一步的筛选。2.初诊断T2DM病例组血浆中hsa-mi R-185-5p和hsa-mi R-328-5p表达水平高于对照组。在调整控制其他危险因素后,血浆中hsa-mi R-185-5p和hsa-mi R-328-5p高表达与T2DM患病可能存在关联,其对T2DM调控作用的机制仍有待进一步的研究。患者血浆中hsa-mi R-185-5p与FPG、HOMA-IR水平呈正相关。3.单独应用hsa-mi R-185-5p筛检T2DM易造成漏诊,适用于对非病人的排除;单独应用hsa-mi R-328-5p筛检均会造成部分漏诊及误诊情况。hsa-mi R-185-5p、hsa-mi R-328-5p联合T2DM非遗传性危险因素进行筛检,可能有助于提高T2DM风险预测效能。