降植烷诱导ApoE-/-C57BL/6小鼠狼疮样病变并动脉粥样硬化模型的雌激素受体α基因启动子呈低甲基化状态

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【目的】分析系统性红斑狼疮(SLE)合并动脉粥样硬化(AS)模型鼠全基因组DNA甲基化水平及雌激素受体α(ERα)基因启动子甲基化状态,探讨其在SLE并AS发病机制中的作用。【方法】将11只apoE-/-C57BL/6小鼠随机分为造模组(A组)、对照组(B组);11只普通C57BL/6小鼠亦随机分为造模组(C组)、对照组(D组)。模型组一次性腹腔注射降植烷0.5ml,对照组一次性腹腔注射生理盐水0.5ml;8个月后处死小鼠,提取基因组DNA,检测其全基因组DNA总甲基化水平,并采用甲基化特异的焦磷酸测序法分析雌激素受体α基因启动子甲基化状态,比较各组间的差异。采用SPSS17.0进行统计学分析,4组间两两比较用单因素方差分析,方差齐时使用LSD-t检验,方差不齐时采用Tamhane’s T2检验。【结果】1.全基因组DNA甲基化水平分析A组、B组、C组、D组基因组DNA总甲基化率分别为(4.7±1.5)%、(5.1±0.5)%、(6.6±1.6)%、(7.5±1.6)%。与D组对比,A组、C组全基因组DNA总甲基化水平明显下降(P<0.05);与B组对比,A组全基因组DNA总甲基化水平明显下降(P<0.05);而B组与D组对比差异无统计学意义(P>0.05)。2.雌激素受体α基因启动子甲基化状态2.1雌激素受体α基因启动子区平均甲基化率分析结果A组、B组、C组、D组ERα基因启动子区平均甲基化率分别为(13.0±3.1)%、(26.7±7.2)%、(15.7±3.8)%、(21.4±4.2)%。A组、C组与D组对比ERα基因启动子区平均甲基化水平明显下降(P<0.05);A组与B组对比ERα基因启动子区平均甲基化水平明显下降(P<0.05);而B组与D组对比升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。2.2雌激素受体α基因启动子区各个CpG位点甲基化率情况与D组对比,A组、C组的ERα基因启动子区中7个CpG位点甲基化水平均降低,其中各有3个CpG位点差异具有统计学意义(P<0.05);而B组的7个CpG位点甲基化水平均为升高,其中有4个CpG位点差异具有统计学意义(P<0.05)。与B组对比,A组7个CpG位点甲基化水平均明显下降(P<0.05)。【结论】降植烷诱导ApoE-/-C57BL/6小鼠狼疮样病变并动脉粥样硬化模型全基因组DNA甲基化水平降低,其雌激素受体α基因启动子呈低甲基化状态,表观遗传学在SLE并AS发病机制可能具有重要作用。
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