【摘 要】
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目的:探讨天然牛磺酸与肝硬化门脉高压蛋白质、HSA（人血清白蛋白）之间相互作用。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为四组:正常对照组、模型组、心得安对照组、天然牛磺酸组。除正常组外,余三组用四氯化碳法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型,天然牛磺酸组、心得安组按等效剂量计算给药量,正常组和模型组予等量生理盐水给药。测量门脉高压指标。提取肝脏组织蛋白,配制成相同浓度蛋白溶液。使用荧光分光光度计测量温
【基金项目】
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2018年国家自然科学基金项目（项目批准号:8186140290）《天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压抑制作用量子力学研究》；
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目的:探讨天然牛磺酸与肝硬化门脉高压蛋白质、HSA（人血清白蛋白）之间相互作用。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为四组:正常对照组、模型组、心得安对照组、天然牛磺酸组。除正常组外,余三组用四氯化碳法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型,天然牛磺酸组、心得安组按等效剂量计算给药量,正常组和模型组予等量生理盐水给药。测量门脉高压指标。提取肝脏组织蛋白,配制成相同浓度蛋白溶液。使用荧光分光光度计测量温度为291,301,311K时大鼠蛋白、HSA有无猝灭剂时的荧光光谱。同时测量天然牛磺酸与蛋白反应体系中未加入竞争剂及加入吲哚美辛、布洛芬不同竞争剂时的荧光光谱图。结果:1.模型组大鼠肝细胞出现肿胀、气球样变,肝脏汇管区大量胶原纤维沉积,肝索排列出现紊乱,有明显假小叶形成。天然牛磺酸组、心得安组肝组织损伤改善明显。其中天然牛磺酸组较显著。与正常组比较,模型组、天然牛磺酸组、心得安组门静脉压力（PVP）、门静脉流量（PVF）、HR（心率）显著升高（P＜0.05）,平均动脉压（MAP）显著降低（P＜0.05）。2.根据Stern-Volmer方程计算出HSA及大鼠蛋白的Kq值均明显大于最大动态猝灭速率2.0×1010L.mol-1s-1。3.结合常数:不同温度下HSA的表观结合常数Ka分别为37.6,66.9,260。正常组、模型组、天然牛磺酸组Ka值均分为两组。正常组一组:373、12.55、10.80;二组:3.479、2.81、2.61。模型组一组:329、8.64、44.11;二组:19.89、16.91、27.57。天然牛磺酸组一组:6.47、86.49、289;二组:19.92、16.76、49.80。4.热力学相关参数值:HSA不同温度下自由能（ΔG）:-1.8431X10~4、-1.8765X10~4、-1.9099X10~4。其中焓变（ΔH）和熵变（ΔS）不同温度下值相同。ΔH:-8707.6336;ΔS:33.41395。正常组ΔG、ΔH均为为负值,ΔS为正值;天然牛磺酸组ΔG、ΔH均为正值,ΔS为负值,模型组无明显规律。5.荧光共振能量转移（FRET）相关参数:HSA:R=2.06,r=3.04。正常组、模型组、天然牛磺酸组R值分别为1.77、2.35、2.28nm,r值分别为1.24、1.31、6.56。6.位点竞争:在无竞争剂,有布洛芬、吲哚美辛竞争剂时HSA结合常数Ka值分别为6.29、2.34、1.24x10~3。正常组:3.32、5.42、94.9;模型组:977、4.23、226;天然牛磺酸组:10.2、2.49、555。结论:天然牛磺酸可能通过改变四氯化碳诱导的肝硬化门脉高压大鼠的肝脏组织蛋白结构而达到改善肝组织损伤及血流状态的作用。
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