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目的:研究MicroRNA-576-3p与低氧条件下胶质瘤恶性进展的关系,通过体外观察Transwell小室下层的细胞数目、划痕实验中相对的迁移细胞数量以及血管形成实验中成管的状态,来分析miR-576-3p对低氧条件下胶质瘤迁移能力和促血管生成能力的影响。进一步通过双荧光素酶报告了解miR-576-3p与HIF-1α的靶向作用关系,以期分析相关作用机制,为神经胶质瘤的临床相关治疗提供新的见解。方法:使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)在临床神经胶质瘤样品和低氧处理的神经胶质瘤细胞中检测miR?576-3p的表达,并分析其与胶质瘤级别和低氧条件下的表达差异。通过构建慢病毒稳定转染的胶质瘤细胞株,敲低miR-576-3p的表达并探究其对低氧处理的神经胶质瘤细胞迁移和促血管生成能力的影响。此外,使用miRWalk,miRanda和TargetScan网站在线工具预测miR?576?3p的候选靶标。通过双荧光素酶报告基因检测、蛋白质印迹(Western Blot)以及RT-PCR验证miR-576-3p与HIF-1α的作用关系。通过构建慢病毒稳定转染的细胞株,敲低HIF-1α的表达,研究其对低氧处理的神经胶质瘤细胞迁移和促血管生成能力的影响,并采用Western Blot、ELISA检测MMP2和VEGF的表达。最后,采用回复实验探究在过表达miR-576-3p的基础上HIF-1α的外源过表达对低氧处理的神经胶质瘤细胞迁移和促血管生成能力的影响。结果:(1)与神经胶质瘤标本相比,非癌性脑组织中的miR-576-3p显著升高,并且在缺氧诱导的神经胶质瘤细胞株中观察到miR-576-3p显著下调。(2)划痕实验、Transwell和血管生成实验的结果表明,与对照组相比,miR-576-3p的慢病毒过表达细胞株显著减弱了低氧条件下神经胶质瘤细胞的迁移和促血管生成能力。(3)miRWalk,miRanda和TargetScan网站在线工具预测miR-576-3p与HIF-1α存在相互结合的作用位点,并且双荧光素酶报告基因检测分析和蛋白印迹分析表明通过直接靶向HIF-1α的3‘-UTR,miR-576-3p的外源过表达可以显著降低HIF-1α在低氧条件下胶质瘤细胞株中的蛋白表达。(4)划痕实验、Transwell和血管生成实验的结果表明,与对照组和空白组相比,低氧条件下敲低HIF-1α的表达对胶质瘤细胞的迁移和促血管生成能力有显著的抑制作用。(5)回复实验表明,HIF-1α表达的回复减弱了miR-576-3p对神经胶质瘤细胞迁移和促血管生成能力的影响,并且相应的MMP2和VEGF的蛋白表达水平也发生了改变。结论:本研究证实了miR-576-3p是一种新型的胶质瘤抑制剂,在低氧条件下能够抑制胶质瘤的恶性进展,通过靶向HIF-1α的表达,从而对低氧诱导的神经胶质瘤细胞的迁移和促血管生成能力产生有效的抑制。