目的本研究通过建立实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis, EAT)模型,观察微量元素硒(selenium)在适碘和低碘的情况下对自身免疫性甲状腺疾病的预防和治疗作用,并探讨其机制,为硒用于这类疾病的防治提供科学依据。方法1.饲料中碘、硒含量的测定：分别采用砷铈催化分光光度法和2,3-二氨基萘荧光法进行测定,并检测精密度和准确度,根据测定的结果向饲料中添加适量的亚硒酸钠进行干预。2.适碘和低碘条件下硒对自身免疫性甲状腺炎的影响：以甲状腺球蛋白和完全弗氏佐剂混合复制实验性自身免疫性甲状腺炎模型。对大鼠的甲状腺组织进行病理学检查,观察淋巴细胞的浸润及甲状腺上皮细胞结构的变化情况,同时,放免法测定甲状腺自身抗体(TGAb、TMAb),两者结合以判断造模是否成功。使用试剂盒检测肝组织抗氧化指标GSH-Px和SOD活性,放免法测定肝组织中的I型和II型脱碘酶活性,免疫组化法观察细胞凋亡Fas/FasL的情况。结果1.饲料中微量元素碘、硒含量的测定：低硒、低碘和普通饲料中微量元素碘的含量在0～0.90mg/kg之间,硒的含量在0.01～0.30mg/kg之间,其平行样品测定的相对标准偏差均低于10%,回收率在85～105%的范围之内。2.适碘和低碘条件下硒对自身免疫性甲状腺炎的影响：(1)甲状腺组织病理学检查：与正常甲状腺组织相比,模型组(Model)大鼠的甲状腺组织损伤,包括滤泡上皮的变性坏死和大量淋巴细胞的浸润。其它各组腺体也都遭到了不同程度的破坏。(2)甲状腺自身抗体(TG抗体和TM抗体)水平变化：Model组TG抗体和TM抗体比Control组显著升高(P<0.05),其中,TG抗体升高了719%,TM抗体升高了929%。在适碘和低碘条件下各组TG抗体和TM抗体相对于Control组升高明显(P<0.05),但相对Model组没有变化(P>0.05)。另外,TG抗体和TM抗体呈高度正相关(P<0.05)。(3)甲状腺绝对和相对重量的变化：与正常对照组(Control)相比,模型组(Model)大鼠甲状腺的绝对和相对重量有所增加(P<0.05)。低碘条件下的三个硒水平(I-Se++M、I-Se+M、I-Se-+M组)与Control、 Model组比较,甲状腺明显肿大,绝对和相对重量均增加(P<0.05)。(4)硒对大鼠抗氧化系统的影响：①大鼠肝组织中的GSH-Px活性的变化：Model组GSH-Px的活性比Control组有所下降,但差别无统计学意义(P>0.05)。在适碘的条件下不同硒水平组(Se++M、Se+M、Se-+M组)中,Se++M组的GSH-Px的活性较高(P<0.05),Se-+M组可见GSH-Px活性明显降低(P<0.05)；在低碘的条件下三个硒水平(I-Se++M、rSe+M、I-Se-+M组)中, I"Se++M比I-Se+M组GSH-Px活性升高(P<0.05),T-Se-+M组与前两组相比明显降低(P<0.05)。②SOD活力的变化：低碘条件下rSe++M、I-Se+M、I-Se-+M三组分别与Control、Model组相比,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),其它各组相互比较均未见变化(P>0.05)。(5)硒对脱碘酶活性的影响：①大鼠肝组织中Ⅰ型脱碘酶的活性的变化：Model组与Control组相比没有变化(P>0.05)。在适碘条件下,Se++M组Ⅰ型脱碘酶的活性高于Control组和Model组(P<0.05),Se~-+M组肝组织脱碘酶活性低于Se~+M组和Se+M组(P<0.05),Se~++M组脱碘酶活性高于Se+M、Se-+M组(P<0.05)；在低碘条件下,虽可见缺硒组比补硒组肝组织脱碘酶活性低,但未见统计学差异(P>0.05)。②大鼠脑组织中II型脱碘酶的活性的变化：Model组与Control组相比Ⅱ型脱碘酶的活性相对降低,但差别无统计学意义(P>0.05)。在适碘条件下三个硒水平(Se++M、Se+M、Se-+M组)脑组织中Ⅱ型脱碘酶的活性,Se-+M组与Se++M、Se+M组相比有降低的趋势,差别无统计学意义(P>0.05)。低碘条件下的三个硒水平(I-Se++M、rSe+M、I-Se-+M组)中,I-Se-+M组相对于其它两个组脑组织中II型脱碘酶的活性有升高趋势,差别也没有统计学意义(P>0.05)。(6)甲状腺组织中Fas及其配体FasL的表达：与正常组比较,其它各组染色面积大而且颜色重,表明表达量明显增多(P<0.05)。适碘条件下,可见Se++M组表达量比Model组减少。低碘条件下I-Se-+M组Fas蛋白表达量相对其它组增加(P<0.05)；FasL表达量在ISe-+M组出现显著增加(P<0.05),对组织损伤加重。结论1.利用TG和CFA进行EAT模型的复制,可见大鼠的甲状腺组织出现炎细胞浸润和自身抗体明显升高,为疾病的研究奠定了基础。2.在适碘条件下,补硒可以升高体内脱碘酶的活性,催化T4转化为T3,使GSH-Px活性提高,降低过氧化物水平,共同调节甲状腺激素的代谢。另外,可以抑制Fas蛋白的表达,对其介导的细胞凋亡有一定拮抗作用。3.低碘条件下,补硒可以升高GSH-Px的活性,降低Fas的表达量,从而影响疾病的发生；低碘低硒联合可以明显加重疾病对机体的损伤。