【摘 要】
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该课题试图以滋养层细胞表达HLA-C为模型,对其功能进行研究.为此克隆了HLA-C基因,并将它表达在HLA I类分子阴性的JAR细胞上,从以下几方面初步探讨了HLA-C分子的生物作用.第一
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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该课题试图以滋养层细胞表达HLA-C为模型,对其功能进行研究.为此克隆了HLA-C基因,并将它表达在HLA I类分子阴性的JAR细胞上,从以下几方面初步探讨了HLA-C分子的生物作用.第一部分 HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达;为研究滋养层细胞表达HLA-C分子的生物学作用及它与NK细胞受体之间的相互作用.第二部分HLA-C细胞表面表达对RSA病人外周血NK细胞功能的影响;利用直接分离的外周血NK细胞对JAR细胞和表达HLA-C的JAR细胞进行细胞毒试验,结果直接分离的NK细胞对两者都无细胞毒作用.第三部分HLA-C表达对HLA-E分子以及NK细胞受体表达的影响;用FACS分析HLA-E分子在细胞表面的表达,结果显示JAR细胞表面表达少量的HLA-E分子(11.18-16.32﹪).而HLA-C转染的JAR细胞表面表达的HLA-E分子明显增高(35.72-43.44﹪),比未转染的JAR细胞表达的HLA-E高出近2倍.通过上述研究表明,我们成功克隆了一个个体的HLA-Cw<*>0602、HLA-A<*>3001和HLA-B<*>27052基因.构建了pcDNA3-HLA-C真核表达载体,并在HLA I类分子阴性的JAR细胞表面稳定表达.HLA-C分子在JAR细胞表面表达未能抑制IL-2活化的正常人和RSA病人的NK细胞的细胞毒作用,也不能抑制它们IFN-γ的产生.RSA病人的NK的细胞毒作用与正常人无显著差别.但它可提高HLA-E分子在JAR细胞表面的表达,并下调NK细胞表面的KIR2D受体和CD16受体.它在滋养层细胞表达的作用之一可能是通过调节NK细胞表面的受体在母胎界面上起一定的调节作用.
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