生长激素(Growth hormone，GH)是由脑垂体嗜酸性细胞分泌的单链多肽类激素，一般由173-191个氨基酸组成。GH具有广泛的生理功能，可以显著促进个体的生长发育，如体重和体长的增加、骨骼和肌肉的生长、脂肪的代谢等。本研究首次克隆了小鳄龟(Chelydra Serpentina)GH基因全长，并进行序列分析和组织表达特点研究。主要研究结果如下：　　 (1)根据不同物种GH基因的保守区域，设计特异引物扩增获取小鳄龟GH基因部分cDNA序列，再利用SMART RACE技术克隆获得全长cDNA，共965bp，包括62bp的5UTR，654bp的ORF和249bp的3UTR。预测GH基因编码217个氨基酸，其中，信号肽为26个AA，成熟肽为191个AA。分析小鳄龟GH基因的5UTR调控区域，预测存在C/EBP，MyoD，deltaE，SRY(2个)和HSF2六个转录因子结合位点。预测乌龟GH基因的5UTR区进行比较，发现存在与小鳄龟相同的转录因子结合位点。　　 (2)克隆了小鳄龟GH基因内含子序列，经拼接获得GH基因全长序列，共9541bp，包括5个外显子(72bp、164bp、117bp、162bp、422bp)和4个内含子(4743bp、523bp、1055bp、2255bp)。通过与其它16种脊椎动物的GH基因内含子进行比较，表明内含子数目变异较小，爬行类、哺乳类、鸟类均为4个，少数鱼类为3个或5个；在长度上变异较大，爬行类最长，其次是鸟类、鱼类，哺乳类的最短。　　 (3)比较35种脊椎动物GH氨基酸序列，发现信号肽区域差异程度较大，而成熟肽区域表现出高度保守性，约23％的氨基酸在所有物种中完全一致。其中包括4个半胱氨酸和2个C端保守区CFKKD和ETYL。　　 (4)利用生物信息学软件比较35种脊椎动物的CDs(Coding sequence)，结果表明小鳄龟GH基因CDs序列与乌龟的相似性最高，达98.5%，仅2个碱基的差异，且属于同义替换；其次是鸟类约82%；与哺乳类的相似性约72%，但与人和恒河猴的相似性只有64.5%和66.5%；与两栖类的相似性介于60%-70%之间；与鱼类的相似性最低，约55%。利用邻近归并法(Neighborjoining)对GH基因的CDs序列进行聚类分析，结果显示小鳄龟与鸟类、其它爬行类动物聚为一类，鱼类和两栖类动物聚为一类，哺乳类自成一类。　　 (5)利用Realtime-PCR技术研究小鳄龟GH基因mRNA水平的表达，结果表明：GH基因主要在脑部组织表达，其中，垂体的表达量最高，其次是小脑、大脑，下丘脑表达相对较低。除脑部组织外，GH基因在肌肉组织中表达最高。肺、脾脏和卵巢中的表达处于中等水平。心脏、肾脏表达水平较低，脂肪组织有微量表达，小肠，肝脏和胃基本不表达。GH基因在小鳄龟垂体外组织的表达暗示GH可以通过旁分泌或自分泌的方式发挥作用。