罗格列酮钠对葡萄糖胺诱导的HIT-T15细胞线粒体损伤的影响的初步研究

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目的 观察葡萄糖胺(GLcN)、罗格列酮钠(RSG)对HIT-T15细胞线粒体形态、胰岛素释放、ATP/ADP的比值、核呼吸因子(NRFs)及过氧化物体增殖物激活受体γ共激活因子(PGC-1)表达的影响。初步探讨RSG保护β细胞的机理。 方法 以SV40病毒转化的叙利亚仓鼠胰岛β细胞株HIT-T15细胞作为研究对象,对GLcN、RSG进行了以下方面的研究:1.透射电镜观察HIT-T15细胞线粒体超微结构。2.流式细胞仪检测HIT-T15细胞凋亡峰,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记技术(TUNEL)测定凋亡细胞。3.用高效液相色谱法检测HIT-T15细胞的ADP、ATP及ATP/ADP的比值。4.放免法测定细胞培养48小时后及高糖(22mM)刺激1小时后上清液胰岛素的浓度。5.用RT-PCR法检测NRF-1mRNA及PGC-1mRNA的表达。实验分组:(1)正常对照组;(2)高浓度葡萄糖培养组:葡萄糖浓度为11mM;(3)高浓度葡萄糖+RSG10-6M培养组;(4)高浓度葡萄糖+RSG10-8M培养组;(5)GLcN8mM+高浓度葡萄糖培养组;(6)GLcN8mM+高浓度葡萄糖+RSG10-6M培养组;(7)GLcN8mM+高浓度葡萄糖+RSG10-8M培养组。各组均培养48小时。 结果 1.透射电镜观察HIT-T15细胞可见GLcN组可见凋亡细胞及较多
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