目的 利用大鼠颌下腺颗粒曲管细胞(Granular convoluted tubule cells，GCTs)富含多种生物活性因子的特性，与脊髓神经干细胞(Neural stem cells，NSCs)联合培养，观察对脊髓神经干细胞增殖、分化的影响。寻求促进神经干细胞增殖、分化的安全有效的方法，为神经系统疾病的替代治疗提供理想可靠材料。 方法 1、取孕13天SD 大鼠，无菌条件下分离出胎鼠脊髓组织，原代和传代培养。应用免疫细胞化学方法(Nestin)鉴定NSCs。2、分别取雌、雄SD大鼠颌下腺，通过酶消化法和40％percoll液梯度离心法，分离出GCTs，原代和传代培养。3、将原代GCTs与脊髓NSCs联合培养，以单独培养的脊髓NSCs为对照组。第七天免疫荧光化学方法(Nestin，NSE，GFAP)鉴定细胞。在荧光显微镜200倍目镜下计数视野内阳性细胞数，与对照组进行t检验。4、分别将雌、雄GCTs培养上清液与脊髓NSCs培养液1∶1混和，培养脊髓NSCs，以普通培养液组为对照组。第2-7天连续用四甲基偶氮唑盐(MTT)法，在酶连免疫检测仪上测490nm吸光度A值，绘制细胞生长曲线。免疫细胞化学方法(Nestin，NSE，GFAP)鉴定细胞。 结果 1、原代和传代NSCs悬浮生长，第11天可以见到数百个细胞组成的神经球，经鉴定神经球Nestin抗原阳性。少量贴壁细胞，经鉴定NSE或GFAP抗原阳性，2、GCTs贴壁生长，倒置显微镜下可见细胞核周围有较多分泌颗粒。3、联合培养组Nestin抗原阳性神经球数目大于对照组。三组均有少量贴壁细胞，经鉴定为NSE或GFAP抗原阳性。4：雄性混合培养液组NSCs增殖活性最强，雌性混合培养液组其次，对照组最弱。 结论 GCTs与NSCs联合培养后，促进NSCs增殖、抑制分化。雄性大鼠GCTs比雌性大鼠GCTs促进NSCs增殖的作用更强。