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目的:严重急性呼吸道综合征(SARS),亦称非典型肺炎。是于2002年底在我国广东首先出现的一种具有高度传染性的新型呼吸系统疾病。随后,至2003年初,SARS已经扩散到加拿大、新加坡、越南等三十多个国家及地区。经研究分析确定SARS的病源是一种新型冠状病毒,取名为SARS冠状病毒(SARS-CoV)。 通常来说,包膜病毒通过病毒包膜糖蛋白与细胞表面受体结合,使细胞膜结构发生改变,导致膜融合和病毒基因释放入细胞浆。冠状病毒也不例外,是通过其包膜糖蛋白-刺突(S)蛋白与宿主细胞表面受体结合后引起膜融合的;S蛋白在病毒包膜表面形成了冠状病毒特征性的突起,大而明显。这种20-40nm的表面复合体同样也存在于SARS-CoV颗粒的外表面。但是,已知的SARS-CoV S糖蛋白氨基酸全序列与其他冠状病毒的S糖蛋白相比同源性很低(20-27%氨基酸一致性)。S糖蛋白是产生中和抗体的主要靶抗原,其不仅在抗病毒产生中和抗体的免疫反应中发挥重要作用,也与细胞免疫,被动抗体保护密切有关。因此,S蛋白尤其是S蛋白受体结合区(RBD)被预测是感染免疫和候选疫苗的重要成分。鉴于此,本课题选取了SARS-CoV S蛋白受体结合区的编码基因为研究对象,构建了原核表达质粒pET32a(+)/S1和Bac-to-Bac杆状病毒载体,尔后分别在原核细胞E.coli