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目的:探讨烟酰胺（nicotinamide,NAM）在贝伐单抗（bevacizumab,BEV）诱导人视网膜色素上皮细胞系（a human retinal pigment epithelial cell line,ARPE-19）发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）中的作用及发挥作用的机制,为减轻临床抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）药物引起的眼底新生血管纤维化提供新思路。方法:对ARPE-19细胞进行体外培养、处理及相关检测。首先,使用BEV处理细胞并按照处理时间的不同分为如下4组:空白对照组、24小时处理组、48小时处理组、72小时处理组。通过Western Blot检测4组中EMT相关标志物的蛋白表达水平,包括3种间质标志物fibronectin、α-SMA和vimentin,以及1种上皮标志物ZO-1。根据检测结果选择一个经BEV处理细胞后EMT相关标志物变化最明显的时间点,并将其作为最佳处理时间用于后续实验。其次,使用BEV和（或）NAM按照如下4组处理细胞:空白对照组、BEV处理组、BEV和NAM共同处理组、NAM处理组,处理细胞的时间依照先前实验得到的最佳处理时间。通过RT-qPCR、Western Blot以及细胞免疫荧光检测上述EMT相关指标mRNA及蛋白的表达情况,以此来观察NAM在BEV诱导细胞发生EMT过程中发挥的作用。通过检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）和H2O2的表达水平以及细胞总抗氧化能力来评价各组细胞的氧化应激情况,以此来判断NAM对氧化应激的影响。采用单因素方差分析对定量数据进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:第一次分组的实验结果显示,BEV成功诱导ARPE-19细胞发生EMT。在24小时处理组中,fibronectin和vimentin的蛋白表达量虽然与空白对照组相比略有提高,但差异均无统计学意义（P=0.61和P=0.58）。而α-SMA的蛋白表达量与空白对照组相比有所提高以及ZO-1的蛋白表达量略有降低,差异均有统计学意义（P=0.006和P=0.001）。在48小时处理组中,fibronectin、α-SMA和vimentin的蛋白表达量与空白对照组相比均有明显提高,同时ZO-1的蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义（P<0.001）。在72小时处理组中,不仅上述3种间质标志物的蛋白表达量与空白对照组相比进一步增多,而且ZO-1的蛋白表达量进一步减低,差异均有统计学意义（P<0.001）。由此可见,BEV处理细胞72小时后EMT相关标志物的变化最明显,因此选择72小时作为最佳处理时间进行后续实验。第二次分组的实验结果显示,通过RT-qPCR和Western Blot检测,BEV和NAM共同处理组中fibronectin、α-SMA和vimentin的mRNA和蛋白表达水平较BEV处理组均明显降低,差异均有统计学意义（P<0.001）;同时ZO-1的mRNA和蛋白表达水平均明显提高,差异均有统计学意义（P<0.001和P=0.004）。不仅如此,细胞免疫荧光检测直观显示了经BEV处理后α-SMA的荧光增强,与空白对照组相比呈现高表达。当使用BEV和NAM共同处理细胞后其荧光显著减弱,与BEV处理组相比其表达水平明显降低。由上述结果可知,NAM在ARPE-19细胞中有效地抑制了BEV诱导的EMT。除此之外,BEV诱导细胞发生氧化应激,具体表现为促进了细胞中ROS和H2O2的积聚,以及降低了细胞的总抗氧化能力。当给予BEV和NAM共同处理后,细胞的氧化应激反应显著减轻,表现为细胞中ROS和H2O2的含量明显减低,且细胞的总抗氧化能力也有所提高,差异有统计学意义（P<0.001）。结论:NAM可以通过减轻BEV诱导ARPE-19细胞发生的氧化应激从而抑制EMT。因此,NAM在未来可能作为一种有效药物来减轻抗VEGF治疗引起的眼底新生血管纤维化。