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目的:探讨DCC-2036对三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）MDA-MB-231、HS-578T细胞凋亡、增殖、侵袭的影响及其作用靶点和相关机制。方法:实验主要分为三部分:第一部分,评估DCC-2036对TNBC细胞的治疗作用。培养T-47D、MCF-7、MDA-MB-231、HS-578T、MDA-MB-436、MDA-MB-468、ZR-75-1和SK-BR-3细胞系并使其稳定传代;通过MTS实验检测DCC-2036和其他临床乳腺癌抗肿瘤药物（如顺铂、紫杉醇、吉西他滨、多柔比星、拉帕替尼、他莫昔芬）对MDA-MB-231、HS-578T的影响并进行综合对比。第二部分,揭示DCC-2036对TNBC细胞凋亡、增殖和侵袭的影响。实验以TNBC的乳腺癌细胞系作为研究模型,通过流式技术检测DCC-2036处理后,TNBC细胞凋亡的改变;通过Transwell、克隆形成实验检测DCC-2036处理后,其增殖和侵袭能力的改变;第三部分,验证DCC-2036对TNBC作用的分子机制及主要作用靶点。根据蛋白芯片免疫组织化学法检测乳腺癌肿瘤组织中P-AXL/T-AXL,P-MET/T-MET的表达情况;RT-PCR实验检测DCC-2036处理后在TNBC细胞中AXL和MET mRNA水平;Western Blot检测在DCC-2036处理后,MDA-MB-231、HS-578T细胞中,各信号转导节点的变化。结果:1.我们的研究证实DCC-2036（Rebastinib）可抑制TNBC细胞的增殖,侵袭迁移,以及诱导细胞凋亡。而且,其抗增殖活性比大多数乳腺癌临床常用抗肿瘤药物更有效。DCC-2036作用MDA-MB-231、HS-578T细胞的IC50值低于其他大部分临床常用抗肿瘤药物。MDA-MB-231、HS-578T细胞对DCC-2036的IC50值小于MCF-7细胞。DCC-2036和顺铂或拉帕替尼的联用对MDA-MB-231细胞的活性抑制作用优于单药（CI﹤1）。DCC-2036作用后MDA-MB-231、HS-578T细胞G1期细胞数目增加（P值<0.0001）,而S期细胞数目减少（P值<0.0001）。平板克隆实验中,DCC-2036处理后的MDA-MB-231、HS-578T细胞形成的克隆变小,数目变少(P MDA-MB-231<0.01,PHS-578T<0.0001)。Transwell实验中,DCC-2036作用后MDA-MB-231、HS-578T细胞穿过聚碳酸酯Transwell膜的细胞明显减少（P值<0.0001）。使用流式细胞技术检测DCC-2036的凋亡诱导能力,显示DCC-2036作用后,MDA-MB-231、HS-578T细胞凋亡亚群数目更多（各组间P值有统计学意义）,数目小于MCF-7细胞。2.在机制上,我们发现DCC-2036可以通过靶向抑制AXL/MET,然后调控下游PI3K/Akt-NFκB信号传导以在抑制TNBC的增殖,侵袭迁移和上皮间质转化（EMT）。通过抗体芯片确定DCC-2036处理下调了包括MET/HGFR和AXL在内的21种RTK以及6种重要信号节点。cDNA微阵列显示DCC-2036使酪氨酸激酶表达减少（>2倍）。对比MCF-7,T47D,ZR-75-1,SK-BR-3,MDA-MB-231,HS-578T,MDA-MB-436和MDA-MB-468细胞中P-AXL、P-MET的基本表达、总蛋白水平及其配体（GAS6、HGF）水平,发现MDA-MB-231,HS-578T细胞中,P-AXL/AXL/GAS6、P-MET/MET/HGF均高表达。在体外实验中,IC50MDA-MB-468>IC50MDA-MB-436>IC50HS-578T>IC50MDA-MB-231。在体外沉默AXL比沉默MET和对照组对MDA-MB-231增殖抑制更为明显（P值<0.0001）,但是弱于同时沉默AXL和MET（P值<0.0001）。DCC-2036处理后MDA-MB-231、HS-578T细胞的AXL/MET的mRNA水平降低（P值<0.0001）。DCC-2036处理后MDA-MB-231、HS-578T细胞P-AXL/P-MET蛋白表达水平均明显降低。AXL或MET沉默（尤其是AXL沉默）抑制了MDA-MB-231细胞的增殖,并能部分逆转DCC-2036诱导的MDA-MB-231细胞中的增殖抑制和细胞死亡DCC-2036能抑制MDA-MB-231和HS-578T细胞P-Akt,P-IκBα,P-P65和P65的表达,上调IκBα表达。DCC-2036处理后,胞浆中P-P65,P-IκBα表达降低,但是总蛋白水平反而增加,而的核内的P65水平下降。E-钙粘蛋白的表达能被DCC-2036显著上调,而间充质标记物如Vimentin,TCF-ZEB1,Snail和Slug的表达在MDA-MB-231和HS-578T细胞中则被下调了。结论:1.DCC-2036可以对MDA-MB-231、HS-578T细胞表现出高度的有效活性,抑制细胞的增殖、侵袭、EMT,以及诱导细胞凋亡,且其抑制效果优于大多数临床常见药物。2.DCC-2036能通过靶向AXL/MET而下调PI3K/Akt-NFκB信号通路,其中AXL为DCC-2036作用的主要靶点。